[发明专利]纤维素酶的两阶段共水解方法

摘要

一种生物技术领域的纤维素酶的两阶段共水解方法，本发明的方法包括如下步骤：将里氏木霉ZM4－F3在水解产糖培养基中水解48h，然后将培养至对数生长期的铜绿假单胞菌BSZ－07接种到其中，接种量为里氏木霉ZM4－F3的4％。铜绿假单胞菌BSZ－07可产生鼠李糖脂生物表面活性剂，以促进稻草酶解的进行。在后续的48h两株菌共水解阶段中，采用温度32－35℃、pH值5.5。由于纤维素酶两阶段共水解新工艺有效解决了铜绿假单胞菌BSZ－07与里氏木霉ZM4－F3进行共水解时难以相互兼容的关键问题，因而可有效提高纤维素酶的水解效率。

主权项

1、一种纤维素酶的两阶段共水解方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步、生物质冲洗去除杂质，切成1到2厘米的小段，置于69℃到71℃烘箱中干燥至恒重，然后将剪切好的生物质用碱进行预处理，具体方法为：将剪好的生物质置于指质量体积比为2％的氢氧化钠溶液中，其中氢氧化钠溶液的体积数值为放入的生物质的质量数值的3.8到4.2倍；在84℃到86℃水浴58到62分钟，然后用蒸馏水洗至pH至7，置于烘箱中干燥至质量不再增加；第二步、用预处理后的生物质制备里氏木霉ZM4-F3水解产糖培养基，然后将里氏木霉ZM4-F3置于该水解产糖培养基中，在29℃到31℃、195到205rpm摇床的水解条件下水解47到49小时；第三步、将铜绿假单胞菌BSZ-07接种至种子培养基中培养至对数生长期；第四步、将培养至对数生长期的铜绿假单胞菌BSZ-07接种至发酵产剂培养基中，接种浓度为里氏木霉ZM4-F3接种浓度的4％；然后在温度为32℃、pH值为5.5的条件下进行两株菌的共水解。