[发明专利]一种源于鱼皮的ACE抑制肽的制备方法

摘要

一种源于鱼皮的ACE抑制肽的制备方法，它以罗非鱼鱼皮为原料，水提罗非鱼鱼皮中的鱼皮蛋白，采用蛋白酶进行水解，经灭酶、脱苦、脱色、脱味、过滤、离子交换和浓缩等工序得到鱼皮蛋白酶解液(TSP－I)，将TSP－I超滤(截流分子量为9000Da)处理后，再经SephadexG－15凝胶层析收集高活性组分，冷冻干燥制得高活性的ACE抑制肽产品。本发明对于实现罗非鱼废弃物的综合利用，提高其附加值具有重要意义。

主权项

1、一种源于鱼皮的ACE抑制肽的制备方法，其特征是方法步骤为：(1)预处理：清洗后的鱼皮经脱脂后，依次用0.1mol/L的盐酸溶液和0.1mol/L的氢氧化钠溶液浸泡1hr；(2)水提：预处理后的鱼皮经洗涤至中性后，在45℃条件下，用10倍体积的蒸馏水恒温匀浆12hr后，抽滤提取上清液；(3)酶解：在一定条件下，采用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，比较两种酶的酶解效果，并确定最佳酶解条件；(4)灭酶：采用100℃，20min灭酶；(5)脱苦、脱色、脱味：分别采用活性炭和复合脱色剂对酶解液进行脱苦、脱色、脱味处理，比较两种方法的效果；(6)过滤：酶解液经脱苦、脱色、脱味处理后，再经4000r/min离心过滤获得清液；(7)离子交换：取一定体积的超滤液在常温下以8倍柱体积/h的流速通过732强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，收集流出液，再将脱阳离子后的水解液以8倍柱体积/h的流速通过717强碱性I型阴离子交换树脂，收集流出液；(8)浓缩：使用旋转蒸发仪，浓缩温度为50℃，蒸发溶液至粘稠状；(9)超滤：选用中空纤维材料，超滤设备的工作压力为28psi，膜渗透通量为9.98LHM，超滤处理时间为40min，进料温度为29℃，料液pH值为6.7；(10)凝胶色谱：收集超滤液进入凝胶色谱进行进一步分离纯化，分离介质为SephadexG-15，色谱柱(1.6×60cm)，柱层析条件：上样量：1.5ml；流速：0.8ml/min；洗脱剂：蒸馏水；检测波长：220nm；(11)冷冻干燥：高活性ACE抑制组分在-80℃预冻8hr后，真空冷冻干燥72hr，即得产品。