[发明专利]一种诱导蜘蛛产生抗菌活性物质的方法

摘要

本发明提出了一种简便、高效的诱导蜘蛛产生抗菌活性物质的方法。其步骤为：a.紫外线照射诱导：将角类肥蛛放于培养皿中，于20w紫外灯下距离1米处照射0.5－3h，然后在正常条件下继续饲养；b.将诱导后1－120h的蜘蛛用组织匀浆法提取采集蜘蛛血淋巴，c.以支气管败血博氏菌为指示菌，用涂平板打孔法，测定血淋巴的抗菌活性。经紫外线照射诱导的蜘蛛提取的蜘蛛血淋巴抗菌活性最高，用该抗菌活性物质可以用于抗菌药物的开发。

主权项

1、一种诱导蜘蛛产生抗菌活性物质的方法，其特征在于步骤为：a、紫外线照射诱导：将角类肥蛛放于培养皿中，于20w紫外灯下距离1米处照射0.5-3h，然后在正常条件下继续饲养；b、诱导后蜘蛛的饲养：将经紫外线照射的蜘蛛单头饲养于φ4×12cm玻璃指管内，管底垫有吸足水的海绵供蜘蛛饮水，用棉花塞封口，然后将装有蜘蛛的玻璃指管置于25℃培养箱中，光照周期为12∶12(Light∶Dark)，每2天清洗玻璃指管，并喂以果蝇(Drosophila sp.)和摇蚊(Tendipes sp.)成虫；c、采用组织匀浆法提取采集蜘蛛血淋巴：将诱导后1-120h的蜘蛛用75％酒精消毒，然后置于冰浴中的1.5ml离心管中，加入预冷的无菌水匀浆，当外界温度较高时，还需加入1-5％的防止抗菌物质黑化的巯基乙醇，匀浆液于4℃、12000rpm离心20分钟，去除上层脂肪，收集上清液置-20℃冰箱保存；d、以支气管败血博氏菌为指示菌，用涂平板打孔法，测定血淋巴的抗菌活性。