[发明专利]能够用于山茱萸品种鉴定的DNA片段及其制备方法

摘要

本发明涉及能够用于山茱萸品种鉴定的DNA片段及其制备方法，可有效解决山茱萸种质资源分析、药材鉴别、杂交育种的问题，解决的技术方案是，该DNA片段为ST37全长589bp，ST43全长825bp，ST92全长837bp，其制备方法是，取山茱萸植物叶片研碎，加入PVP粉末研成细粉，将细粉置于提取缓冲液中，离心，弃去上清夜，加入用Vc+2×CTAB制成的抽提液以及β－巯基乙醇，混匀，加入由等体积的饱和酚－氯仿－异戊醇制成的溶液处理2次，除去杂质，离心，取上清液，加入异丙醇，收集沉淀物，抽干乙醇，得DNA物质，制备RAPD片段，进行克隆，对克隆后DNA序列测定，方法简单、科学，经济和社会效益巨大。

主权项

1、一种能够用于山茱萸品种鉴定的DNA片段，其特征在于，该片段为三部分：ST37，全长589bp，ST43，全长825bp，ST92，全长837bp，其中：ST37，全长589bp为ST37的全序列-589bp：1 CTTGTCTGTG GATGGTGCTC GGTACCGTAA TACGACTCAC TATAGGGCGA CATATGATCG ATGATATCCC ATGGGCGGCC81 GCCTGCAGAC CAGGTCTGAC CGCTTGTCTG TGGATGGTAA GCAAGGGTGA CTTTATGGGT CACACCGTAC TTTTTCATCA161 AAGCTTCAAA TGATCTATTG CAGAAATATT TTCCTCCATC ACTAATGATA GCCCGAGGTG TTCTAAATCT AGGTAAGACA241 TTGGTTTTGA GAAATTCAAT GACCACAACA TGGTCGTTTG TCTTACACAC AATAGCTTCG ATCCACTTAG ATACGTAATC321 TACAGCGACA AGAATATACA AATTACCGAA AGAGTTGGGG AAAGGTCCTA TGAAATCAAT GCCCCAAACA TTGAAGATTT401 TGATGATTAG AATTCGATTA GGTGGCATCA TATTTCATTT GGAAATGTTT CATAATAGTT AACAACGGGA ACAAGACTTA481 CAATAAAGCT TGGTATCCTT AAATATGGGG GGCCAATAAA ATCCACACTG CAAAATTTTT GCAGCAATTC TATGATCACT561 AAAGTGGCCT CTAGTGTGGA TTTTATTGG；ST43，全长825bp为ST43的全序列-825bp：1 TAACCCGGCA GTTGTAATTC GAGCTCGGTA CCGTAATACG ACTCACTATA GGGCGACATA TGATCGATGA TATCCCATGG81 GCGGCCGCCT GCAGACCAGG TCTGGTGATC TTGATTCCTT CCTGCAAGTC ACCTGCTGGC ATGATGTCTT GTTGCAGTGA161 TGATGTTTGT CGTTGGTTGC TGTGAGATCT TGTTATCCCC TGACTCCTCT AAACATCGTA CCAGGAAGCA TTAAGTGGTG241 TGGGGGCTGG GCCTGCTTAC GAATGAACTT AACTTTATTT GCTGTGTTGT TATCGCTGCC CTCTTTGCAC TCAGAAAAGC321 CGTGTTGGCA TCTGTATTGA TTAAGCCGCC CCGACACGAG AATCGGTGTG TTGAGTATTG GCTCTTCCTC CGCTTCCTTA401 CTCGCTTACC TGCTGCGCTT CGTTCTGCTG CTGCGAGCAG CGTCATCATC TTAGAAAGAT GCAGTAATGT TATTATCCAC481 ATCATCAAAT AATAACGCAA GAAACAACTT ATGAGCAGAT CGTCATAAGG ACCCCAGCCA CCGAAACGAG GCGTCGCTGC561 TGCTTTTATT CCATAGCCTC CGCCCCGCTG ACCAGCATAA AAAACAACGA TCCTAAACCA CGTGGCGCCC CCACCCTGGC641 TCTTACTATG ATGCTTCTCT GTTTCTCCTG TAGAATAGCT CCGTCGTGTG TTCTGAAGCT ACGACGCTGA CTATCAAAGA721 AATACCTCTC CTTCTTTCTC CCTTCAGGAG GCGCGGTTCT TTTTCATACT GACTGTGGAT TTAAACCTCT GCATCTGCAG801 GACACCCCTG CCTTTTGGGC TTGTT；ST92，全长837bp为ST92的全序列-837bp：1 CAAAAAACGG CAAGTTGAAT TCAAGCTCGG TACCGTAATA CGACTCACTA TAGGGCGACA TATGATCGAT GATATCCCAT81 GGGCGGCCGC CTGCAGACCA GGTCTCAGCT CACGACAGAG CGGGGAGACA TTGAGATGCC ATCGGTGTGG TCAGCCGGGG161 CACATCAAAA GGAACTGTCC TCATGGTGGC AGTGGTGCAG GAGTGGCTAG GGGTTTTCAG CACGGACCCA GGCCAGCCAC241 CGGGACGCAG GCAGATTTCA GACCTCCTCT TCCTTCTCAG ACAGAGGCTT ATGCTCAGAG ATTCCAGTCT GGGAAGGGTG321 TGGCAGGGAC TTCAGGTCAG CAGACGGGTC CCAGGGGGGG GGTTCCCGGA GAGATCCGCC GCGCACATCC GCGCTTACAG401 CTGTTCTTGC TGCGCTTGCG GAAGAGGGAG AGGCTTCCAC CGACCCTTCA ATGATCGGGG GTAGGATTGC CTTTGTCACC481 GTTTTTGCTG ATGCGGTAGT TGCATTGGGA GCCACCGTGC CATACATTGC GAACGAGGTT GGAACAGCTT TGACGGTGCT561 GATTATGCCG ATCGATGTGC CCCCCTCTTG TGAGCATTCC TATGGGCGTG CATGTGGGCC TGGACAGAAG GATGCCACAT641 ACTGTGGAAA TGACCATTCT CATATGCAAG CTGATATGTG ATTACGTGGG GATCGACAAG GCGAGTCCTG ATATGGAATT721 TCGTGACGCA TTGGTTGGCC ACATTTGAGG GCTCTCTTGA TTCGATCTGG GTGAAGGGTC AGTAAGAAGA ACAAGATAGA801 TACGGAAAAT GTTTGTGGGG AGAACACCCC GGACATC。