[发明专利]一种禽流感四联灭活疫苗的制备方法

摘要

一种禽流感四联灭活疫苗的制备方法，其制备方法步骤如下：①生产用毒种的制备：②制苗用病毒液的制备：③灭活疫苗的制备：取灭活的浓缩3.5倍NDV La Sota株、IBV M₄₁株、AIV HL株病毒液和浓缩4倍的EDSV AV127株病毒液按1∶1∶1∶1.5的比例混合，取混合后的病毒液97～99份，加入吐温-80 1～3份，混合制成水相；取白油96份、司本-80 4份、硬脂酸铝2制成油相；④将水相与油相混合，水相与油相混合之比为1∶1.5～2.5，一起乳化，即制得禽用四联灭活疫苗，该疫苗具有免疫效果好，工艺简单，经济效益高等优点。

主权项

1、一种禽流感四联灭活疫苗的制备方法，其特征是：其制备方法步骤如下：①、生产用毒种的制备：将NDV La Sota株毒种用灭菌生理盐水作10-4稀释，将IBV M41株毒种用灭菌生理盐水作10-2稀释，将AIV HL株毒种用灭菌生理盐水作10-3稀释后，分别接种9～10日龄SPF鸡胚，置37℃继续孵育，收获鸡胚液；将EDSV AV127株毒种用灭菌生理盐水作10-2稀释后接种10～11日龄易感鸭胚，置37℃继续孵育，收获鸭胚液；②、制苗用病毒液的制备：将NDV La Sota株生产毒种用灭菌生理盐水作10-4稀释，将IBV M41株生产毒种用灭菌生理盐水作10-2稀释，将NDV La Sota株毒种和IBV M41株毒种同时接种9～10日龄SPF同一鸡胚上，置37℃继续孵育，收获鸡胚液；将AIV HL株生产毒种用灭菌生理盐水作10-3稀释后，接种9～10日龄SPF鸡胚，置37℃继续孵育，收获鸡胚液；将EDSV AV127病毒生产毒种用灭菌生理盐水作10-2稀释后接种10～11日龄易感鸭胚，置37℃继续孵育，收获鸭胚液；将NDV La Sota株、IBV M41株、AIV HL株病毒液作3.5倍浓缩，将EDSVAV127株病毒液作4倍浓缩；浓缩后分别灭活；③、灭活疫苗的制备：取灭活的浓缩3.5倍NDV La Sota株、IBV M41株、AIV HL株病毒液和浓缩4倍的EDSV AV127株病毒液按1∶1∶1∶1.5的比例混合，取混合后的病毒液97～99份(体积份)，加入吐温-801～3份(体积份)，混合制成水相；取白油96份(体积份)、司本-80 4份(体积份)、硬脂酸铝2(体积份)份制成油相；④、将水相与油相混合，水相与油相混合之比为1∶1.5～2.5，一起乳化，即制得禽用四联灭活疫苗，分装，贴签，装箱、入库。