[发明专利]一种奶牛乳腺细胞体外分离培养方法无效
申请号: | 200810050853.0 | 申请日: | 2008-06-23 |
公开(公告)号: | CN101302494A | 公开(公告)日: | 2008-11-12 |
发明(设计)人: | 刘春龙;李忠秋;孙海霞;李长胜 | 申请(专利权)人: | 中国科学院东北地理与农业生态研究所 |
主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06 |
代理公司: | 长春科宇专利代理有限责任公司 | 代理人: | 杨恕平 |
地址: | 150081黑龙江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明公开了一种奶牛乳腺细胞体外分离培养方法,它涉及细胞体外分离培养技术领域,它解决了分离培养奶牛乳腺上皮细胞时不能将奶牛乳腺纤维细胞和上皮细胞很好分离的问题。通过直接采取自当地屠宰厂当日屠宰的奶牛乳腺组织,利用成纤维细胞和上皮细胞对胰蛋白酶敏感性的不同及贴壁时间的差异,采用组织块培养法和胰蛋白酶分级消化法分离培养奶牛乳腺上皮细胞,将奶牛乳腺细胞纯化,经角蛋白18鉴定后,最终得到相应的细胞系。本发明提供了一种分离培养奶牛乳腺上皮细胞时最佳胰蛋白酶浓度,且较好地将奶牛乳腺纤维细胞和上皮细胞分离。 | ||
搜索关键词: | 一种 奶牛 乳腺 细胞 体外 分离 培养 方法 | ||
【主权项】:
1、一种奶牛乳腺细胞体外分离培养方法,其特征在于:直接采取自当地屠宰厂当日屠宰的奶牛乳腺组织,采用组织块培养法和胰蛋白酶分级消化法相结合,使用0.05~0.07%胰蛋白酶/EDTA分离培养奶牛乳腺上皮细胞。
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