[发明专利]高效生产犬白细胞干扰素的方法无效
| 申请号： | 200810052898.1 | 申请日： | 2008-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN101260143A | 公开（公告）日： | 2008-09-10 |
| 发明（设计）人： | 古长庆 | 申请（专利权）人： | 天津生机集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K14/555 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 | 代理人： | 刘英兰 |
| 地址： | 301609*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效生产犬白细胞干扰素的方法，实施步骤如下：(1)无菌采集犬血，加入抗生素和抗凝剂，4.0℃冰箱放置；以2000－4000rpm离心犬血，收集灰黄层，用配置好的培养液稀释细胞沉淀物，使白细胞浓度稀释为每ml含1×105－1×107；(2)白细胞悬液中加入100－1000IU/ml干扰素，于37℃水浴搅拌培养2－3小时；(3)再加入羧甲基茯苓多糖，使其最终浓度为25－100μg/ml，于37℃水浴搅拌培养1－2小时；(4)在启动的白细胞悬液中再加入适量诱生剂鸡新城疫病毒，使其最终浓度为128－1280血凝单位/ml，37℃摇床搅拌培养18－24小时；(5)待干扰素达到高峰值时，离心收集上清，加入盐酸调至pH 2.0，4.0℃，放置1－4天，灭活病毒，再加NaOH调至pH7.0，即得粗制犬白细胞干扰素。该方法生产的干扰素含量高，生产成本明显降低。 | ||
| 搜索关键词： | 高效 生产 白细胞 干扰素 方法 | ||
【主权项】：
1、一种高效生产犬白细胞干扰素的方法，其特征在于具体实施步骤如下：(1)无菌采集犬血，加入10μg/ml卡那霉素和适量抗凝剂，4.0℃冰箱放置；以2000-4000rpm离心犬血，收集灰黄层，用配置好的培养液稀释细胞沉淀物，使白细胞浓度稀释为每ml含1×105-1×107；(2)白细胞悬液中加入少量干扰素，使其最终浓度为100-1000IU/ml，于37℃水浴搅拌培养0.5-2小时；(3)再加入羧甲基茯苓多糖，使其最终浓度为25-100μg/ml，于37℃水浴搅拌培养1-2小时；(4)然后在上述白细胞悬液中再加入适量诱生剂鸡新城疫病毒，使其最终浓度为128-1280血凝单位/ml，37℃摇床搅拌培养18-24小时；(5)待干扰素达到高峰值时，离心收集上清，加入盐酸调至pH 2.0，4.0℃，放置1-4天，灭活病毒，再加NaOH调至pH 7.0，即得粗制犬白细胞干扰素。
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