[发明专利]南极海洋芽孢杆菌n2a高产低温过氧化氢酶分离纯化方法有效
| 申请号： | 200810057970.X | 申请日： | 2008-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN101230338A | 公开（公告）日： | 2008-07-30 |
| 发明（设计）人： | 孙谧;王跃军;郑媛;朱重昊 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08;C12N1/20;C12R1/07 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种南极海洋芽孢杆菌n2a高产低温过氧化氢酶分离纯化方法，包括菌株摇瓶培养、超声破碎、硫酸铵沉淀，阴离子交换层析和凝胶过滤得到电泳纯低温过氧化氢酶。该方法工艺简单，快速效果好，用来分离纯化低温过氧化氢酶有效、可靠、经济方法。 | ||
| 搜索关键词： | 南极 海洋 芽孢 杆菌 n2a 高产 低温 过氧化氢酶 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种南极海洋芽孢杆菌n2a高产低温过氧化氢酶分离纯化方法，其特征在于包括下列步骤：①将南极海洋芽孢杆菌n2a置于含有培养基的摇瓶中，于20-30℃，在摇床上培养至指数生长期晚期，后于0-10℃离心收集菌体；②将步骤①收集菌体悬于三羟甲基氨基甲烷HCl，pH7.5的缓冲液A中进行超声破碎，在0-4℃离心取上清液；③取步骤②的上清液中加入硫酸铵至40％饱和度，于0-4℃离心收上清液，再加硫酸铵至70％饱和度，于0-4℃离心收沉淀；④将步骤③的沉淀对缓冲液A透析过夜，离心取上清液，上阴离子交换柱，室温下用安玛西亚AKTA FPLC装置以0.5-2.0m/分流速的缓冲液A平衡柱，再以0-0.3mol/L NaCl梯度洗脱收集活性组分；后用聚乙二醇2000浓缩后上柱，后用含0.15mol/L NaCl缓冲液A平衡洗脱，收集活性组分，聚乙二醇2000浓缩，得电泳纯低温过氧化氢酶。
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