[发明专利]铁皮石斛优质种苗快速繁殖方法

摘要

本发明是铁皮石斛优质种苗快速繁殖方法。其方法为：(1)取铁皮石斛未展叶新芽，经灭菌将茎尖接种到固体培养基，建立无菌体系；(2)切取无菌体系幼苗的茎段或基部小组织块，在适宜的激素组合和培养基上，诱导出原球茎；(3)原球茎在液体和固体继代增殖培养基上交替培养，快速增殖形成原球茎团；(4)将原球茎团切开，转接到固体成苗培养基上分化植株，形成小苗；(5)将小苗转接到固体壮苗培养基上壮苗、生根，培育出完整的植株；(6)将无菌壮苗定植至适宜的炼苗基质中，获得优质种苗。本发明可用于大规模工厂化生产，具有外植体去污率高、增殖率高、变异率低、种苗粗壮、品质好、移栽后成活率高、生长势强等优势。

主权项

1.一种铁皮石斛优质种苗快速繁殖方法，其特征在于具体步骤如下：1)外植体诱导材料消毒的方法：在2-4月上旬，切取野生或人工栽培的铁皮石斛未展叶新芽，流水冲洗10～15分钟，将外植体在超净工作台上用75％的酒精浸泡45±5秒后，再用质量百分比浓度为1克/升的氯化汞溶液、2～3滴吐温-80浸泡8分钟，无菌水冲洗3遍，用解剖刀剥除外部叶片，再放入质量百分比浓度为1克/升的氯化汞溶液、2～3滴吐温80中浸泡5分钟，无菌水冲洗3遍，逐层剥去叶片直至露出生长点，接种到1/2MS固体培养基上萌发植株，建立无菌体系；2)原球茎诱导：切取无菌体系幼苗的茎段或基部小组织块接种到原球茎诱导培养基；3)继代增殖：将诱导出的原球茎接种到液体和固体增殖培养基上交替培养，增殖培养30天为一个继代周期；4)成苗培养：将原球茎团转接到成苗培养基上，培养2-3周，形成小苗；5)壮苗生根培养：当无根苗高2-3厘米时，转接到壮苗生根培养基上培养；6)试管苗移栽：当壮苗培养6周，试管苗能长至8-10厘米高，转移到自然光下炼苗7天后，将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入刨花+猪粪共同发酵后的混合基质中，保持适当的通风和足够的湿度，2周试管苗可恢复生长。