[发明专利]一种通过花药培养获得马蹄莲单培体植株的方法

摘要

本发明涉及一种通过花药培养获得马蹄莲(Zantedeschia aethiopica)单培体植株的方法，属花卉育种技术领域。本方法步骤为：取蕾期马蹄莲幼小花蕾、消毒；取花药置于愈伤组织诱导培养基上培养、诱导小孢子形成愈伤组织；将愈伤组织置于芽诱导培养基上培养，诱导愈伤组织形成芽；将芽置于生根培养基上培养，诱导芽生根，获得马蹄莲单培体植株。应用该方法对马蹄莲花药进行离体培养，其：平均2.4％的花药长出愈伤组织，平均每个愈伤组织能分化出6.8个芽，单倍体植株的比率为69.6％。本方法获得的马蹄莲单培体植株经染色体加倍，只需要一个世代就获得遗传上稳定的纯系，通过产生单培体植株而获得纯系是有效加速育种材料的纯化与育种进程的一条途径。

主权项

1、一种通过花药培养获得马蹄莲单培体植株的方法，包括外植体消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织分化芽及芽生根步骤；其特征在于：a. 愈伤组织的诱导：用解剖刀将经消毒的花药从花蕊上刮下，接种在愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基配方为Gamborg B5+蔗糖80g/L+KT1.0mg/L+2，4-D0.5mg/L+琼脂7g/L，花药接种密度为60-70个花药/60x15mm培养皿，培养条件为32℃、暗培养2天后，转入25℃、暗培养50天，再将其转至上述愈伤组织诱导培养基，在25℃、黑暗条件下，进行继代培养20天，花药长出愈伤组织；b. 愈伤组织分化芽：将上述继代培养20天后的愈伤组织置于芽诱导培养基，诱导生芽，芽诱导培养基配方为MS+蔗糖30g/L+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+琼脂7g/L，pH5.8，在温度25℃，光强2000Lx，光照时间16小时培养条件下，培养30天后愈伤组织分化出芽，芽经生根后形成马蹄莲单倍体植株。