[发明专利]新序列人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其高效表达

摘要

本发明属于基因工程和生物制药领域；在GenBank已收录的A29117的IGF-I基因序列基础上，根据同义突变的原理，利用拼接PCR的方法克隆出大肠杆菌密码子偏爱性的新序列人胰岛素样生长因子-I基因，通过融合表达、亲和层析纯化、酶切获得具有代替牛血清促进CHO细胞生长的活性的人胰岛素样生长因子-I多肽，其优点为新序列的IGF-I在大肠杆菌内的表达量高，可达35-40％，拼接PCR的方法比人工合成全基因的成本明显降低，同时原核表达代替真核表达缩短了培养周期也降低了成本，为人胰岛素样生长因子-I的深入研究及应用打下良好的基础。

主权项

1. 一种新序列人胰岛素样生长因子-I基因，包括该人胰岛素样生长因子-I氨基酸序列：GlyPro Glu Thr Leu Trp Gly Ala Glu Leu Val Asp Ala Leu Gln Phe Val Trp Gly Asp Arg Gly PheTyr Phe Asn Lys Pro Thr Gly Tyr Gly Ser Ser Ser Arg Arg Ala Pro Gln Thr Gly Ile Val Asp GluTrp Trp Phe Arg Ser TrpAsp Leu Arg Arg Leu Glu Met Tyr Trp Ala Pro Leu Lys Pro Ala LysSer Ala，其特征在于新序列人胰岛素样生长因子-I基因的核苷酸为：GGC CCG GAAACCCTG TGG GGC GCA GAA CTG GTG GAT GCA CTG CAG TTT GTG TGG GGC GAT CGCGGC TTT TAT TTC AAC AAA CCG ACC GGCTAT GGC TCC AGC AGT CGC CGC GCGCCG CAG ACC GGC ATT GTG GAT GAA TGG TGG TTT CGC AGC TGG GAT CTG CGCCGC CTG GAAATG TATTGG GCG CCG CTG AAA CCG GCG AAG TCA GCATAG。