[发明专利]褐色喜热裂孢菌木糖异构酶在酿酒酵母中的活性表达与应用无效
| 申请号： | 200810073563.8 | 申请日： | 2008-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN101260394A | 公开（公告）日： | 2008-09-10 |
| 发明（设计）人： | 王青艳;杨登峰;黄日波;孙靓;陆雁;肖代俊;黄志民;黎贞崇 | 申请（专利权）人： | 广西科学院 |
| 主分类号： | C12N9/90 | 分类号： | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/81;C12P1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 530003广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种以褐色喜热裂孢菌为来源提取木糖异构酶的方法及褐色喜热裂孢菌木糖异构酶在酿酒酵母中的活性表达与应用。所述褐色喜热裂孢菌木糖异构酶的分子量为43KD，酶的最适反应温度为80～85℃，酶的最适反应pH是7.0。该酶能够在正常的生化反应条件下将木糖转化为木酮糖，该酶基因可以重组到酿酒酵母菌中，在酿酒酵母中实现活性表达，并可利用木糖或其它碳源如木质纤维素水解物产生包括乙醇在内的各种发酵产物。本发明利用基因工程手段，拓展乙醇转化的底物，对于木质纤维素资源全利用具有重要的理论意义和应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 褐色 喜热裂孢菌木糖异构酶 酿酒 酵母 中的 活性 表达 应用 | ||
【主权项】：
1、一种褐色喜热裂孢菌木糖异构酶的提取方法，其特征在于所述的木糖异构酶的基因选自褐色喜热裂孢菌，提取方法包含以下步骤：首先设计正向引物5’-ACTCATATGAAATCTAAAAGATTCCAAGTAT-3’，反向引物5’-ATAGGATCCTTACTCTTCTATTCTTAATTTATTT-3’，从基因组里经聚合酶链式反应获得褐色喜热裂孢菌基因，然后对前述反应产物进行初步纯化，并利用EcoRI和HindIII对反应产物进行双酶切，再与同样经双酶切的穿梭载体pYES2质粒连接，获得表达质粒pYES2-xylA。
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