[发明专利]碱性橙人工抗原合成及抗体制备方法

摘要

本发明属于抗原、抗体的制备方法，专用于非食用色素碱性橙特异性识别、及研制碱性橙的速测免疫试剂盒。包括碱性橙人工抗原合成及其抗体的制备方法，主要以戊二醛为偶联剂分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白合成免疫抗原和包被抗原，并将免疫抗原注射到新西兰大白兔体内，制备出高效价的碱性橙抗体，该抗体稳定性好，效价高，为碱性橙酶联免疫试剂盒的研制解决了技术难点，该方法实用性强，抗原抗体制备过程无需高价值设备，可操作性强，适于大规模生产。

主权项

1、碱性橙人工抗原合成方法，其特征在于包括如下工艺步骤：A、免疫抗原合成取150-250毫克牛血清白蛋白，15-20毫克碱性橙，浓度为50％的戊二醛溶液1-2毫升，分别将其溶于4-6毫升浓度为0.1摩尔/升、pH＝7.4的磷酸缓冲液、0.2-0.3毫升甲醇及1-2毫升浓度为0.1摩尔/升、pH＝7.4的磷酸缓冲液；以戊二醛为偶联剂，将牛血清白蛋白溶液和碱性橙溶液混匀后滴加戊二醛溶液，于室温下放置1小时，在4℃下放置15-20小时，高速离心12-20分钟，上清液转入透析袋，于0.01摩尔/升、pH＝7.4磷酸缓冲液中在4℃透析5-7天，每天更换两次透析液，透析完毕分装成1毫升/管，-20℃冻存。