[发明专利]实时荧光定量PCR检测HCMV gBn的分型方法

摘要

本发明公开了提供一种实时荧光定量PCR检测HCMV gBn的分型方法，在PCR反应体系中加入荧光探针，利用荧光信号积累实时监测PCR进程，进行定量定性分析确定HCMV gBn型。本发明封闭反应，无需PCR后处理，避免污染；特异性强，灵敏度高采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确；实时荧光定量PCR技术既可对HCMV gB进行分型，又可对其进行定量；仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断；可实现一管双检或多检；操作安全，缩短时间，普通PCR约需要1～2天，本发明的方法一般3～4小时可完成，提高效率；可用于临床检测HCMV感染人群gBn分型，预测其预后，并可用于观察HCMV活动性感染，指导临床治疗。

主权项

1、一种实时荧光定量PCR检测HCMVgBn的分型方法，其特征在于：在PCR反应体系中加入荧光探针，利用荧光信号积累实时监测PCR进程，进行定量定性分析确定HCMV gBn型，所用引物和探针为：HCMV-gB1-1：5’-cggttcagtctctcaacg-3’；HCMV-gB1-2：5’-caccacatctccgtacttg-3’；探针HCMV-gB1-3：FAM-ttcccaaacggtcagc-BHQ1-3；；HCMV-gB2-1：5’-ctcgtacgacgtcgtctcaa-3’；HCMV-gB2-2：5’-cacacgcgataggggtactt-3’；探针HCMV-gB2-3：5’-FAM-gagaatagactgac-BHQ1-3’；HCMV-gB3-1：5’-ctcgtacgacgtctgctcaa-3’；HCMV-gB3-2：5’-cacacgcgataggggtactt-3’；探针HCMV-gB3-3：5’-FAM-tgagaagaaactga-BHQ1-3’；HCMV-gB4-1：5’-tatcgtctgtctgggtgctg-3’；HCMV-gB4-2：5’-cgttggctctatgactgacg-3’；探针HCMV-gB4-3：5’-FAM-tgagaggagattga-BHQ1-3’。