[发明专利]以颜色和形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法

摘要

本发明公开了一种以颜色及形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法，该方法采用具有编码的光子晶体水凝胶薄膜，使抗体或者抗原与光子晶体水凝胶薄膜结合，抗体或者抗原的种类用光子晶体水凝胶薄膜的编码来标识，通过多种利用光子晶体水凝胶薄膜标识的抗体或者抗原，同时非标记检测同一个待测样品中相应的抗原或者抗体，待检测分子的有无或者多少由光子晶体水凝胶薄膜的反射峰位移反应。这种以颜色及形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法不用对生物分子进行标记，只需要比较反应前后的反射光谱就可以同时测定待测分子的种类和浓度，具有灵敏度高，检测通量大，操作简单，检测成本低廉等优点。

主权项

1.一种以颜色和形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法，其特征在于检测步骤为：第一步，制备各种不同形状不同颜色的光子晶体水凝胶薄膜：将质量体积比为10％的非紧密堆积型二氧化硅胶体晶体用丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺混合液稀释至质量体积比在3％～6％范围内的具有不同浓度的一组溶液，分别加入光引发剂，排出空气，灌入模具中，在不同浓度的光子晶体凝胶聚合前体溶液的模具上加盖不同形状的掩模，静置20～30min，然后经紫外光照射聚合40～60min，即得不同形状不同颜色的光子晶体水凝胶薄膜，将所得到的光子晶体水凝胶薄膜从模具上剥落，洗涤后置于纯水中保存；第二步，制备多元免疫检测用具有复合编码的光子晶体水凝胶薄膜：将一种颜色或一种形状作为一种编码，选取由第一步制得的具有不同颜色或者不同形状的光子晶体水凝胶薄膜，在具有同种编码的水凝胶薄膜表面包被同种特异性抗原或者抗体制成一种免疫水凝胶薄膜，将分别制备好的免疫水凝胶薄膜用磷酸盐缓冲液洗涤，封闭缓冲液之后，测定得到的每种复合编码光子晶体水凝胶薄膜的反射光谱，将制备的各种不同形状和不同颜色的水凝胶薄膜进行混合，即得到多元免疫检测用具有复合编码的光子晶体水凝胶薄膜；第三步，检测：将第二步得到的多元免疫检测用具有复合编码的光子晶体水凝胶薄膜与待测样品混合进行抗原和抗体的特异性结合反应，反应完毕，用洗涤缓冲液洗涤，分别测定每个光子晶体水凝胶薄膜的反射光谱，同时与没有反应前光子晶体水凝胶薄膜的反射光谱相对比，结合形状以确定其编码，根据编码就能够确定待测抗原或者抗体的种类以及含量。