[发明专利]一种基于OPF水凝胶为液态支架的可注射性心肌组织工程产品

摘要

本发明公开了一种基于OPF水凝胶为液态支架的可注射性心肌组织工程产品。具体涉及应用OPF水凝胶为支架材料，结合不同来源的种子细胞，如胚胎干细胞、间充质干细胞、心肌细胞等，注射移植到动物心梗模型特定区域后观察其修复心肌梗死区域的情况。应用该支架材料构建的可注射性心肌组织工程产品可提高种子细胞的滞留率和存活率，促进心肌组织再生，增加梗死区室壁厚度、重塑原有心室形状、改善心脏功能。由于该产品具有可注射性的特征，便于治疗操作，从而避免了心脏停跳、体外循环等操作所带来的风险。本发明操作工艺简单、实施条件温和，为心肌组织工程提供了一种新的产品，对组织工程化心肌治疗心脏疾患的临床开展具有重要意义。

主权项

1.一种以OPF水凝胶为载体的可注射性组织工程心肌产品的制备方法，步骤包括：(1)OPF的制备：i.通过聚乙二醇(PEG)，富马酰氯和三乙胺(摩尔比1∶0.9∶0.9)一步法反应制备，共沸蒸馏后，PEG被溶于二氯甲烷且富马酰氯和三乙胺在几个小时中被逐滴加入，同时反应烧瓶维持在0℃，然后室温下搅拌1-2天以保证最大转化；ii.为了纯化低聚物，通过旋转蒸发除去溶剂，之后在乙酸乙酯中溶解产物，溶液过滤除去反应中氯离子与三乙胺生成的盐，低聚物在乙酸乙酯中重结晶两次，最后纯的OPF在乙醚中沉淀出来，并真空干燥(＜1mmHg)得到粉末固体；(2)可注射性组织工程心肌产品的OPF水凝胶的制备iii.OPF和交联剂聚乙二醇-二丙烯酸酯(PEG-DA)以2∶1的重量比混合于PBS中，加入等体积的热量自由基引发剂混合物搅拌后，加入含有细胞的PBS悬液使细胞终浓度达到1×107cells/ml，温和混匀后，即为液态的基于OPF水凝胶的可注射性心肌组织工程产品，将悬液注射到心梗部位5-10分钟即可成胶。