[发明专利]角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物无效
| 申请号： | 200810137115.X | 申请日： | 2008-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN101348796A | 公开（公告）日： | 2009-01-21 |
| 发明（设计）人： | 杨谦;王艳君 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/56 | 分类号： | C12N15/56;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/81;C12N9/42 |
| 代理公司： | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 | 代理人： | 金永焕 |
| 地址： | 150001黑龙江*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物，它涉及一种几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物。本发明解决了chi58在巴斯德毕赤酵母中不能高效表达的问题。本发明密码子偏爱性突变体基因序列如SEQ ID NO：2所示。本发明引物Pn1～Pn6的基因序列分别如SEQ ID NO：5、6、7、8、9和10所示。本发明通过融合PCR法获得密码子偏爱性突变体基因。本发明基因与真核表达载体pPIC9K连接构建重组表达载体，再经甲醇诱导后表达的蛋白质分子量为58kD，等电点pI为4.47，经测序检测氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示，证实为角毛壳菌几丁质酶，且几丁质酶的酶活性提高了约3倍。 | ||
| 搜索关键词： | 角毛壳菌 几丁质 基因 密码子 偏爱 突变体 及其 制备 方法 所用 引物 | ||
【主权项】：
1、角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因，其特征在于角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性改造突变体基因序列如下所示：ATGAAGACGTCTCTGAGCTGCGTCTTGCTCTGGGCTGGGCTGGCCGTGGCCGCGTCCAGCTATGAGTCTAGTTTCCTCGTCCAAGCCCGCCAGAGCACGAGGCAAAAGCTCTGGACGCGAGACGACTCAGACCCGAAGTGCACCAAGGATATTCCGTGCAAGATCGGGTGCTGTGGGCCATTAGACAAAGACACTGGTGTCGGCATCTGCGGCTTGGGACCAACCTTCTGCGGCGACGGGTGCACCTCGTCGTGCGACTACAAGAGCGAGTGCGACCCGGGCTGGGGCATGCAGTGGTCCAACGCATCGACGTGCCCCCTCAACGTGTGCTGCAGTGACTTTGGTTTCTGCGGCACGACCGATGAGTTCTGCAAGGGCAAGGAGGTGTCGGTCCCGCAGTGCGACCCGGCCGCCAACAGCTCGCACGCGCGCACCGTCGGCTACTATGAGGGCTGGAACTGGCAGCGCCCCTGCGGCACCATGAAGCCGTCGCAGATCCCGCTCGGTTATTACAGTCACATTTTCTTCGCCTTCTCGTTGCTCGACCCCACCACCTTCCGGCTGTCGCCCATGGATACCGAGACAGGTACCCTGTACGGTGACGTCTCGGCTATCAAGAACCGCCAGCCGGGCGTGCAAGTCTGGATCGCCATCGGCGGCTGGGCGATGAATGACCCCGGTCCGACTCGGCCGACGTTTTCAAACCTGGCCAAGGACGAGGCGGCGCAGGACGAGTTCTTCGAGGCCCTGGTCACTTTCATGATGGCCAACGACTACGACGGTGTCGATATCGACTGGGAATATCCCGTCGCCGACGATAGAGGTGGCAGCGTCGAGGACTTTGATAACTACGTCAACCTGCTCAAGAGACTAAGAGCGAGACTCAACAGCATCGGCGTGCCGAAGGGCCTGTCTATCACGCTGCCCGCGTCGTACTGGTATCTGAAAGGGTTTGACATTGTCAACCTCGAGCCATATGTGGACTTTTTCAATGTCATGACGTATGATATTCACGGTGTCTGGGATTCGACGGTCCAAAGCCTGGGGCCCTATGCCCACGCCCACACCAACCTCACCGAGATCGAGGAGGCACTGAAGCTGCTTTGGAGAAACAACATCAACCCCGAGAGAGTCAACCTGGGCCTGGGTTTCTACGGTCGTAGCTTCACCATGAAAGACCCCTCTTGCATGGCCGCCGGCTGTGAGTTCAGCTCTGGCGGTAACGGTGGCAGCTGCACGGGTACCCCGGGAGTCCTCTCAGCCCACGAGATCGTCCAAATCATCAATAACGGCGCGACGGTGACCACGGACGAAGTGGCCGCCGTGGAGATTGTCACCTGGGACACCAACCAGTGGGTCTCATGGGACAGCACCAAGACGCTGGCCATGAAGGTCAACTACGCCAACGAGCGCTGCCTGGGCGGTGTCATGGTCTGGGCCATCGACCTCGACGACGGCACCCTAATCAAGTCACTTGCCGACACGGGACGGCCCACCTACAATTACTTGACGGACCTCCCCTGGATGACGGGTTGTTTCGGATCCGCGTTTGACGACTGGTCGAGACTGAATGACTCCGACATCGATTCAGGAAGCAGTTAA。
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