[发明专利]表达嗜热子囊菌光孢变种基因Mn-sod的毕赤酵母工程菌株无效
申请号: | 200810140293.8 | 申请日: | 2008-09-25 |
公开(公告)号: | CN101368163A | 公开(公告)日: | 2009-02-18 |
发明(设计)人: | 李多川;宋宁宁;李安娜;李华;赵春青 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N9/08;C12R1/84 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 271018山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明是一种表达嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)热稳定锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因Mn-sod的毕赤酵母工程菌株Pichia pastoris MS18。通过RT-PCR方法从嗜热子囊菌光孢变种获得锰超氧化物歧化酶基因Mn-sod,将其克隆并插入到毕赤酵母整合表达载体pPIC9K中,然后将得到的锰超氧化物歧化酶基因Mn-sod表达载体pPIC9K/Mn-sod导入到毕赤酵母GS115中,再从中筛选出一种表达锰超氧化物歧化酶的酵母工程菌MS18。该工程菌经诱导培养6d后,酶表达量为0.92mg/mL,酶活为2324U/mL,分子量为86.0kDa,酶在50、60℃下活性稳定,80℃保温40min后酶活仍剩余50%,在 90℃处理60min仍具有20%的活性,具热稳定性,可用于热稳定锰超氧化物歧化酶的生产菌株,有重要的经济价值和社会价值。 | ||
搜索关键词: | 表达 子囊 菌光孢 变种 基因 mn sod 酵母 工程 菌株 | ||
【主权项】:
1.一种表达嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascusaur antiacus var.levisporus)热稳定锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因Mn-sod的毕赤酵母工程菌株Pichiapastoris MS18,其特征在于,通过RT-PCR方法从嗜热子囊菌光孢变种获得热稳定锰超氧化物歧化酶基因Mn-sod,将该基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,获得表达重组质粒pPIC9K/Mn-sod,转化毕赤酵母GS115,从中筛选出表达嗜热子囊菌光孢变种热稳定锰超氧化物歧化酶基因Mn-sod的毕赤酵母工程菌株MS18,该菌株可作为热稳定锰超氧化物歧化酶的生产菌株。
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