[发明专利]缬草环烯醚萜生产方法

摘要

本发明公开了一种缬草环烯醚萜生产方法，包括以下步骤：(1)缬草愈伤组织诱导培养及处理：将缬草外植体接种在含相应植物生长调节物质的MS固体培养基上进行培养，每15～30天继代一次，选出环烯醚萜高的缬草愈伤组织；(2)细胞悬浮培养：将缬草愈伤组织转移到液体培养基中进行逐步扩大培养，将经过扩大培养的缬草细胞接种于生物反应器的液体培养基中进行规模化缬草细胞悬浮培养，收获缬草细胞；(3)对收获缬草细胞进行提取分离得到环烯醚萜，本发明解决了缬草环烯醚萜生产的原料匮乏的问题，并且产品纯度高，工艺过程容易控制，成本相对较低。

主权项

1、一种缬草环烯醚萜生产方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)缬草愈伤组织诱导培养及处理：将缬草外植体接种在含相应植物生长调节物质的MS固体培养基上进行培养，pH调至5～7，温度25℃±2℃，光照强度1200～25001x，光照时间每天6～18小时，在固体培养基上每15～30天继代一次，选择生长快、颜色浅、颗粒均匀的细胞作为继代培养，选出环烯醚萜高的缬草愈伤组织；(2)细胞悬浮培养：将步骤(1)获得缬草愈伤组织转移到液体培养基中，在三角瓶、种子罐中进行逐步扩大培养，将经过扩大培养的缬草细胞接种于生物反应器的液体培养基中进行规模化缬草细胞悬浮培养，培养条件：温度25℃±2℃，pH5～7，光照强度1200～25001x，光照时间每天6～18小时，搅拌转速为50～150r/min，培养时间8～25天，收获缬草细胞；(3)环烯醚萜提取分离：将步骤(2)收获的缬草细胞过滤后干燥粉碎得到缬草细胞干粉，将此干粉放入浸提罐中并加入乙醇溶剂，用超声波辅助提取，将提取液过滤、除去滤渣，滤液减压浓缩为环烯醚萜浸膏，将所述浸膏用醇水溶液溶解，经大孔吸附树脂初步分离，再经反相C18柱精细分离，浓缩干燥后得到缬草环烯醚萜产品。