[发明专利]黑曲霉液态发酵果胶酶及其对白水和纸浆中胶体物质控制

摘要

本发明公开了一种黑曲霉液态发酵果胶酶及其对白水和纸浆中溶解和胶体物质的控制方法，通过黑曲霉菌株产果胶酶培养基的优化，确定最优的培养基组合，以提高果胶酶的产量及其稳定性，并分别用来处理造纸白水和控制纸浆中的溶解和胶体物质(DCS)。处理后白水阳离子需求量降低25％-30％，颗粒粒径减小，电导率增大。降解了纸浆内的胶体物质。本发明具有处理工艺操作简单，成本低和易于控制等优点。

主权项

1、一种黑曲霉液态发酵果胶酶制备方法，其特征在于：使用的生产菌株为黑曲霉，保藏号，通过黑曲霉液态发酵产果胶酶，发酵步骤包括：发酵方法：1)培养基的制备种子培养基：摇瓶种子培养基：麸皮10～30g/L；葡萄糖20～30g/L；(NH4)2SO410～20g/L；KH2PO41～3g/L；MgSO4·7H2O 0.5～1g/L，pH值4.0～6.0；发酵培养基：摇瓶发酵培养基：麸皮40～50g/L；(NH4)2SO410～30g/L；NaCl 1～4g/L；MgSO4·7H2O 0.5～3g/L；pH值4.0～6.0；2)发酵培养将黑曲霉试管斜面菌种接入液体种子发酵罐中，在温度30℃，搅拌速度120r/min、通风量0.2m3/h的条件下发酵36h～72h，得到所需要的液体种子；然后按照3％～5％的接种量将种子接入黑曲霉发酵罐，在温度30℃～50℃，搅拌速度120r/min，通风量0.2m3/h的条件下发酵36～72h，然后经过离心分离制得所需纤维素酶酶液，并将其储存在果胶酶存储罐中以备用；3)酶液提纯用截留分子量10000的超滤膜对发酵液样品进行超滤浓缩至原体积的1/10～1/2后，收集浓缩粗酶液备用，进行硫酸铵分级沉淀预实验，确定硫酸铵分级沉淀的浓度为40％～100％，将粗酶液离心去除菌体，向上清液中加入硫酸铵至40％饱和度，4℃放置24h，经4℃，8000r/min离心10min后，上清液继续加入硫酸铵至100％饱和度，4℃放置24h，经4℃，8000r/min离心30min后，收集沉淀，将其溶于pH6.0的乙酸-乙酸钠缓冲液中，用透析袋透析，得到提纯后的酶液。