[发明专利]乳酸杆菌外膜蛋白提取工艺无效
| 申请号： | 200810153995.X | 申请日： | 2008-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN101475625A | 公开（公告）日： | 2009-07-08 |
| 发明（设计）人： | 王小娥;苏建东;李旭东 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/34 | 分类号： | C07K1/34;C07K1/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300300*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供一种作为微生物添加剂的乳酸杆菌外膜蛋白的提取方法，包括：高压细胞破碎机破壁、粗提、SDS沉淀、SDS和HEPES再次沉淀、超滤纯化。其中，所述的高压细胞破碎机的工作参数，优选1000bar、50Hz，破碎2次，超滤优选使用0.45μm的微孔滤膜或截留分子量为6400道尔顿的超滤膜(层析柱等)。本发明方法去除大量破壁后的细胞碎片及一些杂蛋白，再经过超滤后达到了有粗提到精提的效果，并且，浸提物在短时间内保持不变，生物活性不减，同时提高了破碎速度，缩短了破碎时间，可极大地提高提取效率，能满足工业生产的需要。 | ||
| 搜索关键词： | 乳酸 杆菌 膜蛋白 提取 工艺 | ||
【主权项】：
1、一种用于乳酸杆菌外膜蛋白的提取方法，包括：(1)利用高压细胞破碎机进行乳酸杆菌细胞的破壁；(2)粗提物进行6000rpm，15min离心，3次，取上清液；(3)在上清中加2％十二烷酰肌氨酸钠溶液充分混匀，室温作用1h，于4℃10000r/min超速离心1h；(4)将沉淀用10mmoL/LHEPES和等量2％十二烷酰肌氨酸钠溶解，室温作用2h，于4℃10000r/min超速离心1h，将沉淀适量的溶于10mmoL/LHEPES(pH7.4)中。(5)经过超滤处理后，分装。
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