[发明专利]一种生产α-干扰素的纯化方法无效
| 申请号： | 200810153999.8 | 申请日： | 2008-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN101475975A | 公开（公告）日： | 2009-07-08 |
| 发明（设计）人： | 王丽娟;苏建东;李旭东 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/04 | 分类号： | C12P21/04;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/16;C12R1/84;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300300*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种生产α-干扰素的纯化方法，包括发酵、粗提发酵液、阳离子层析柱纯化、硫酸铵纯化、Sephacryl S-200层析柱纯化、Sephadex G-75色谱柱纯化等步骤，其中在层析之前先去热原。本发明方法无需要单克隆抗体层析柱，能经济、快速、高效地的纯化获得纯度高于97％α-干扰素，具有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生产 干扰素 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1、一种生产α-干扰素的纯化方法，步骤包括：(1)重组菌株进行发酵；(2)离心发酵液(6000rpm，离心15min)取上清，通过微滤除杂、超滤浓缩；(3)用醋酸调节浓缩液的pH至5，并过阳离子层析柱(CM Sepharose柱层析)，收集0.45mol/L的目标洗脱峰；(4)加入硫酸铵30％(v/v)至稍混浊，离心取上清(7000rpm，离心10min)；(5)过Sephacryl S-200层析柱，通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱峰；(6)过Sephadex G-75色谱柱，通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱液；(7)得到纯度高于97％的干扰素原液，置于4℃保存。
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