[发明专利]提取大蒜超氧化物歧化酶的方法无效
| 申请号： | 200810159697.1 | 申请日： | 2008-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN101402946A | 公开（公告）日： | 2009-04-08 |
| 发明（设计）人： | 刘建国;王晶冰;汪利平;杨娟 | 申请（专利权）人： | 中国石油大学（华东） |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08 |
| 代理公司： | 青岛高晓专利事务所 | 代理人： | 杨大兴 |
| 地址： | 257061山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种提取大蒜超氧化物歧化酶的方法，属于生物分离工程技术领域，主要是应用超滤分离技术，经过粉碎、热击、离心和超滤四个简单步骤，即可从大蒜中提取高纯度的超氧化物歧化酶，在提取过程中，未使用有机溶剂，有效避免了有机溶剂引起的蛋白变性，杜绝了溶剂残留造成的产品安全隐患，可生产无任何化学添加的高纯度超氧化物歧化酶，环境污染小，分离效率高、产品纯度可调控、便于工业推广。 | ||
| 搜索关键词： | 提取 大蒜 超氧化物歧化酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种提取大蒜超氧化物歧化酶的方法，其特征是按如下步骤进行：①用匀浆机将去皮大蒜匀浆1～2分钟，再向取出的匀浆液中加入3～5倍体积的去离子水或磷酸盐缓冲溶液，磷酸盐缓冲溶液由0～300mM NaCl和20～300mM磷酸盐组成、其pH6.0～8.5，充分搅拌10～30分钟；②将上述溶液在30～70℃下恒温15～30分钟，使不耐热的蛋白质变性，以沉淀形式析出，滤除沉淀；③将上述溶液进行离心操作，条件：室温，转速为5000～8000rpm，弃去沉淀，取上清液；④利用截留分子量为10～50kDa的市售超滤膜对步骤3得到的上清液进行超滤分离，条件为：室温、pH6.0～8.5，所得截留液为超氧化物歧化酶溶液；⑤使用截留分子量为70～150kDa的市售超滤膜在室温下对步骤4所得超氧化物歧化酶溶液做进一步纯化，条件为：室温、pH6.0～8.5，滤出液即为高纯度超氧化物歧化酶溶液；⑥将所得到的超氧化物歧化酶溶液冻干8～10小时，即获超氧化物歧化酶干粉。
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