[发明专利]犬狂犬病病毒NP-ELISA抗体检测试剂盒无效
| 申请号： | 200810162442.0 | 申请日： | 2008-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN101413948A | 公开（公告）日： | 2009-04-22 |
| 发明（设计）人： | 周继勇;颜焰;马益平;尹伟 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | G01N33/577 | 分类号： | G01N33/577;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 310029浙江省杭州市江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 犬狂犬病病毒NP-ELISA抗体检测试剂盒，其中抗体检测板为包被狂犬病病毒核蛋白NP的可拆96孔酶标板，酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记抗犬IgG单克隆抗体，阳性对照为犬狂犬病标准阳性血清，阴性对照为犬标准阴性血清，狂犬病病毒核蛋白NP为利用RT-PCR技术扩增狂犬病病毒ERA疫苗株NP基因1350bp的片段，将其插入到原核表达载体pET-28a的下游构建pET-NP重组表达质粒，以氯化钙法转化大肠杆菌BL21 DE3，经0.01mMIPTG诱导表达，用超声波裂解表达菌体，经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得。包被NP抗体检测板的狂犬病病毒核NP重组蛋白的使用浓度为：2μg/ml，用量为100μl/孔。本发明的优点为特异性强，敏感性高，安全性好。 | ||
| 搜索关键词： | 狂犬病 病毒 np elisa 抗体 检测 试剂盒 | ||
【主权项】：
1. 犬狂犬病病毒NP-ELISA抗体检测试剂盒，试剂盒内设有NP抗体检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，其特征在于：所述NP抗体检测板为包被狂犬病病毒核蛋白NP的可拆96孔酶标板，酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记抗犬IgG单克隆抗体，阳性对照为犬狂犬病标准阳性血清，阴性对照为犬标准阴性血清，所述狂犬病病毒核蛋白NP为利用RT-PCR技术扩增狂犬病病毒ERA疫苗株NP基因1350bp的片段，将其插入到原核表达载体pET-28a的下游构建pET-NP重组表达质粒，以氯化钙法转化大肠杆菌BL21DE3，经0.01mM IPTG诱导表达，用超声波裂解表达菌体，经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得。
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