[发明专利]采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪酶的方法有效
| 申请号： | 200810162594.0 | 申请日： | 2008-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN101514338A | 公开（公告）日： | 2009-08-26 |
| 发明（设计）人： | 杨立荣;杨光;徐刚;吴坚平 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N11/04 | 分类号： | C12N11/04 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人： | 张法高 |
| 地址： | 310027*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪酶的方法。包括如下步骤：1)加入γ-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷、γ-甲基丙烯酰氧丙基三乙氧基硅烷或γ-甲基丙烯酰氧丙基甲基二甲氧基硅烷与正硅酸甲酯或正硅酸乙酯，搅拌混合，加入去离子水和酸或碱催化剂，搅拌，得到均匀的溶胶；2)向溶胶中加入缓冲液，缓冲液含有0.005-0.04g/ml溶胶的脂肪酶，缓冲液的用量为0.5～1ml，搅拌；3)静置老化，真空干燥，研磨，得到固定化脂肪酶。本发明操作过程简便易行，所制备的多种固定化脂肪酶其酶活力较游离酶均有明显提高，其中，固定化的Arthrobacter sp.脂肪酶的水解活力为游离酶的11倍。 | ||
| 搜索关键词： | 采用 甲基 丙烯 丙基 凝胶 制备 固定 脂肪酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪酶的方法，其特征在于包括如下步骤：1)加入摩尔比为3∶1～1∶3，总摩尔数为4mmol的γ-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷、γ-甲基丙烯酰氧丙基三乙氧基硅烷或γ-甲基丙烯酰氧丙基甲基二甲氧基硅烷与正硅酸甲酯或正硅酸乙酯，在200～300rpm下搅拌混合，加入0.5ml的去离子水和30-50μl的0.1mol/l的酸或碱催化剂，0-25℃下继续搅拌30～60min，得到均匀的溶胶；2)向溶胶中加入pH为7.0～9.0，浓度为0.03～0.06M的缓冲液，缓冲液含有0.005-0.04g/ml溶胶的脂肪酶，缓冲液的用量为0.5～1ml，继续搅拌10～30min后，在100～150rpm搅拌1～2h；3)在4～10℃下静置老化12～24h，于30～35℃真空干燥3-7天，研磨，得到固定化脂肪酶。
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