[发明专利]一种新型高分子材料茁霉多糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种新型高分子材料茁霉多糖的制备方法。以甘蔗糖蜜为原料，通过微波-紫外线复合诱变的方法筛选出优良的高产糖菌株，经过优化的发酵条件培养，得到的茁霉多糖产率高。该方法操作简单、又节省成本，此法将在茁霉多糖的工业化大生产中有良好的应用前景。

主权项

一种新型高分子材料茁霉多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)诱变处理单孢子悬液制备：在斜面培养基上加入无菌水，用接种环刮取培养物表面的孢子，制成粗制的孢子悬液。将此悬液振荡20min，过滤悬液，制成孢子浓度约10个/ml的单孢子悬液。微波-紫外复合诱变处理是在致死率＞95％的照射剂量下，先用微波诱变处理后，然后稀释涂布，28℃-30℃培养，然后挑选长势良好的菌株再进行紫外线诱变处理，接着稀释涂布，28℃-30℃培养。(2)生产菌株的筛选菌落初筛：将经诱变后的菌株培养，挑取菌落颜色淡化、形态异常或孢子含量丰富的菌株，斜面保存。摇瓶初筛：将菌落初筛获得的变异菌株接种于发酵培养基中，摇瓶培养，选取多糖产量高的或色素含量明显减少的突变菌株，进行下一步摇瓶复筛。摇瓶复筛：将摇瓶初筛选出的变异菌株继续摇瓶培养，选出多糖产量最高的菌株。(3)茁霉多糖的生成将摇瓶复筛得到的菌株先经过种子培养，然后转入发酵培养。最后将发酵液于4000r/min离心15min，分离上清液与菌体沉淀，将上清液加入2倍体积的无水乙醇，振荡摇匀，4℃放置过夜，使多糖充分沉淀，再4000r/min离心15min，弃上清，沉淀依次用丙酮、乙醚洗涤，80℃烘干至恒重，即得茁霉多糖。