[发明专利]一种埃可病毒30型PCR检测方法无效
申请号: | 200810163049.3 | 申请日: | 2008-12-15 |
公开(公告)号: | CN101429565A | 公开(公告)日: | 2009-05-13 |
发明(设计)人: | 朱坚胜;阮仙利;颜卫华 | 申请(专利权)人: | 浙江省台州医院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人: | 唐银益 |
地址: | 317000浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测埃可病毒30型的方法,包括以下步骤:(1)特异性引物的设计;(2)总RNA的抽提;(3)逆转录反应(RT):将总RNA通过逆转录反应得到cDNA;(4)聚合酶链式反应,即PCR反应:以cDNA作为模板,采用特异性引物对,进行聚合酶链式扩增;(5)电泳分析:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,经EB染色后用凝胶成像系统分析。本发明的有益之处在于:1.针对埃可病毒30型VP基因保守区设计特异性引物,结果准确;2.采用逆转录和聚合酶链式扩增技术,灵敏度高;3.操作步骤简便,耗时少,所需设备普通且种类少。 | ||
搜索关键词: | 一种 病毒 30 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
1、一种埃可病毒30型PCR检测方法,其特征在于,按照以下步骤进行埃可病毒30型的PCR检测:(1)特异性引物的设计:上游引物:5’>cccaagggttatgaagac<3’下游引物:5’>cgggcgacactatttact<3’;(2)总RNA的抽提;(3)逆转录反应:将步骤(2)抽提得到的总RNA通过逆转录反应得到互补DNA,即cDNA;(4)聚合酶链式反应,即PCR反应:以步骤(3)逆转录得到的互补DNA作为模板,采用步骤(1)设计的特异性引物对,进行聚合酶链式扩增;(5)电泳分析:将步骤(4)扩增得到的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,经EB染色后用凝胶成像系统分析。
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