[发明专利]一种构建cDNA文库的方法无效
| 申请号： | 200810168575.9 | 申请日： | 2008-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN101377021A | 公开（公告）日： | 2009-03-04 |
| 发明（设计）人： | 黄惜;翟金玲;徐远峰 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12N15/11;C12N15/63 |
| 代理公司： | 海口翔翔专利事务有限公司 | 代理人： | 李勇 |
| 地址： | 570228*** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | 本发明公开一种构建cDNA文库的方法，其特点是简单快速而且不需要核酸内切酶。该方法的主要步骤包括：(1)以总RNA(或者mRNA)为模板，利用这对引物通过反转录合成cDNA第一条链。(2)利用这对引物通过Taq DNA合成酶催化的PCR合成cDNA第二条链。(3)将步骤(2)得到的PCR产物通过DNA连接酶直接与T－载体连接，然后转化大肠杆菌感受态，得到cDNA文库。本发明的方法构建cDNA文库成本极低，RNA模板需要量很少，而且适用于任何来源生物样品RNA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 cdna 文库 方法 | ||
【主权项】：
1、一种构建cDNA文库的方法，包括以下步骤：1)以总RNA或mRNA为模板，以SEQ ID No.1和SEQ ID No.2为引物，以Invitrogen公司的SuperScript II为反转录酶合成cDNA第一条链；2)以cDNA第一条链为模板，以SEQ ID No.1和SEQ ID No.2为引物，以DNA聚合酶通过PCR扩增合成双链cDNA；3)将步骤2)合成的双链cDNA直接通过T4 DNA连接酶连接到T-载体中，将载体通过转化导入大肠杆菌，得到cDNA文库。
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