[发明专利]应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法无效
| 申请号： | 200810174166.X | 申请日： | 2008-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN101434640A | 公开（公告）日： | 2009-05-20 |
| 发明（设计）人： | 梁国栋;张明杰;李圭哲;陈海宁;符启骄;周湘龙 | 申请（专利权）人： | 海南海梁生物高科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/107 | 分类号： | C07K1/107;C07K1/18 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 570216海南省海*** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | 应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法，将蛋白质溶液加入相应的填料中搅拌反应，使蛋白质均匀地吸附在填料上，然后将吸附蛋白质的填料滤干，加入含活性聚乙二醇(PEG)溶液中，充分搅拌反应，使活性聚乙二醇(PEG)与蛋白质共价结合，然后将填料装柱、洗脱并收集PEG修饰的蛋白质，使蛋白质的修饰及修饰后的蛋白质的分离一步完成。这种新颖的方法一搅拌填料反应法解决了上述文献中生产单聚乙二醇化蛋白质药物产率低下的问题(最高不超过60％)，使生产单聚乙二醇化蛋白质的转化率达到90％以上，并且PEG与蛋白质结合位点均一，体外活性保留与其他方法相当。PEG修饰降低了蛋白质的免疫原性，增加了蛋白质的稳定性，延长了蛋白质在体内的半衰期。 | ||
| 搜索关键词： | 应用 聚乙二醇 修饰 基因工程 蛋白质 方法 | ||
【主权项】：
1、应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法，将浓度1～8毫克/毫升的蛋白质溶液加入装有填料的容器中，搅拌1～4小时，搅拌速度为20～200转/分钟，使蛋白质均匀地吸附在填料上；然后将吸附蛋白质的填料滤干，加入浓度为相对蛋白质浓度的3～7倍摩尔比活性高分子聚合物溶液中，搅拌1～12小时，反应温度为4℃～23℃，搅拌速度为20～200转/分钟，使活性聚乙二醇与蛋白质共价结合；然后将填料装柱、用缓冲液梯度洗脱分离，并收集单PEG修饰的蛋白质。
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