[发明专利]一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法无效
申请号: | 200810204695.X | 申请日: | 2008-12-16 |
公开(公告)号: | CN101748130A | 公开(公告)日: | 2010-06-23 |
发明(设计)人: | 龚祖埙;吴鸿菲;吴建华;张祖传;张奉武;沈菊英;姚亚媄 | 申请(专利权)人: | 上海凯勃生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/13 | 分类号: | C12N15/13;C12N15/70;C07K16/18 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 赵志远 |
地址: | 201108 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法,包括:(1)从人全血中分离B细胞,并从人微量B细胞中扩增人抗体重链和轻链基因片段;(2)从步骤(1)中获得的基因片段用RT-PCR方法获得人抗体的轻链和重链功能性片段,分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV;(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21,人抗体重链或轻链片段表达后,同时分泌于培养液上清,并形成人单克隆抗体片段复合物。与现有技术相比,本发明构建人单克隆抗体片段复合物的方法工艺先进独特,操作简单,制得的人单克隆抗体片段复合物和抗原特异性结合优良、专一性强,使用安全,有应用于人癌症或传染性疾病的检测和治疗的可能性。 | ||
搜索关键词: | 一种 构建 单克隆抗体 片段 复合物 方法 | ||
【主权项】:
一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)从人全血中分离B细胞,并从人微量B细胞中用RT-PCR方法扩增人抗体重链和轻链基因片段;(2)从步骤(1)中获得的基因片段,分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV;(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21,人抗体重链和轻链片段表达后,同时分泌于培养液上清,并形成复合物,该复合物为人单克隆抗体片段复合物。
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