[发明专利]一种检测核酸点突变的方法

摘要

本发明提供了一种检测核酸点突变的方法。具体地，本发明方法包括与待检测核酸样品与本发明的探针进行杂交，并检测是否形成“待检测核酸-探针”杂交复合物，其中在本发明的探针序列中额外引入一个人工的不匹配位点，从而在探针结合区与待检测的含点突变的序列之间可出现了两个不匹配位点。使用本发明的探针时，可以在反向杂交检测核酸点突变中，使得探针针对野生型和突变型得检测信号产生明显的区别，从而可以更明确地判定检测结果。试验表明，本发明可有效提高检测信噪比从而提高检测灵敏度。

主权项

一种用于检测核酸点突变的探针，其特征在于，所述探针的结构如式I所示：Z-L-B (式I)式中，B表示探针与靶核酸结合的核酸结合区；Z表示可有可无的固相载体；L是连接臂；当Z不存在时，L是用于将B连接于Z的连接臂；当Z存在时，L是已经将B与Z相连的连接臂；并且，所述的探针与靶核酸结合的结合区B具有式II所示的5’-3’结构：S1-P1-S2-P2-S3 (式II)式中，P1和P2分别是一个碱基，其中的一个是针对突变位点的碱基，该碱基与野生型序列互补但与突变型序列不互补，或者该碱基与野生型序列不互补但与突变型序列互补；而另一个是辅助性的不匹配碱基，该碱基既与野生型序列不互补，也与突变型序列不互补；S1是与野生型序列和突变型序列互补的结合区5’端核苷酸序列，其长度为X1个碱基；S2是与野生型序列和突变型序列互补的结合区中部核苷酸序列，其长度为X2个碱基；S3是与野生型序列和突变型序列互补的结合区3’端核苷酸序列，其长度为X3个碱基；其中，X1、X2和X3的长度差的绝对值同时满足以下条件：|X1-X2|≤4；|X3-X2|≤4；|X1-X3|≤4；并且|X1-X2|+|X3-X2|+|X1-X3|≤8。