[发明专利]一种检测铜绿微囊藻毒素的方法

摘要

一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，它涉及一种检测藻毒素的方法。它解决了现有检测微囊藻毒素的方法存在操作复杂、工作量庞大、耗时较多、实验费用昂贵的问题。检测方法：一、将含有铜绿微囊藻的水样震荡混匀、离心处理；二、离心后洗涤然后再离心；三、重复步骤二1～2次后，收集收集离心沉淀物；四、得到铜绿微囊藻毒素提取样样品；五、将铜绿微囊藻毒素提取样浓缩、沸水浴处理、冷却、离心、取上清液避光待用；六、采用液液萃取富集藻毒素；七、富集样品经过滤后用高效液相色谱法进行检测。本发明铜绿微囊藻毒素的检测方法不仅操作简单、快速、成本低廉，并且此方法可靠性强、灵敏度高，特别是对大量样品的测定中更为有效。

主权项

1、一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于检测铜绿微囊藻毒素的方法按以下步骤实现：一、将含有铜绿微囊藻的水样震荡、混均，然后抽取30～40mL震荡混均液放入离心管中，在温度为3～5℃、离心速度为6500～7500r/min条件下，离心处理10～15min，弃掉上清液；二、离心沉淀物再用去离子水洗涤，然后在温度为3～5℃、离心速度为6500～7500r/min条件下，离心处理2～3min，弃掉上清液；三、重复步骤二1～2次，收集离心沉淀物；四、将离心沉淀物溶于5～6mL的去离子水中，得到铜绿微囊藻毒素提取样样品；五、将铜绿微囊藻毒素提取样离心浓缩至2～3mL，然后倒入具塞玻璃试管并加盖，而后在沸水浴中处理13～17min，然后冷却至温度为3～5℃，在离心速度为11000～13000r/min条件下，离心处理10～15min后，取上清液避光待用；六、离心后上清液中加入CCl4，萃取15min，充分混均然后静置至两相分层，弃掉有机相，将水相在滤膜厚度为0.45μm的条件下过滤；七、抽取50μL过滤后样品采用高效液相色谱法进行检测；其中步骤七中检测参数：反相柱为C18，柱长为250mm，内径为4.6mm，填料粒径为5μm，色谱柱温度为40℃，流动相为0.1％的磷酸水溶液与甲醇按40∶60的体积百分比混合，流速为1mL/min，检测器为紫外可见光，检测器波长为238nm。