[发明专利]一种中药何首乌蛋白质的提取方法及其应用无效
| 申请号： | 200810220725.6 | 申请日： | 2008-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN101445548A | 公开（公告）日： | 2009-06-03 |
| 发明（设计）人： | 张敏;刘一流;李续娥 | 申请（专利权）人： | 华南师范大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;A61K38/02;A61P37/04 |
| 代理公司： | 广州粤高专利代理有限公司 | 代理人： | 何淑珍 |
| 地址： | 510630广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种中药何首乌蛋白质的提取方法，将何首乌的干燥块根粉末，脱脂处理后加入50mmol pH为7.4的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液，冷冻离心得缓冲提取液，向其中缓慢加入粉末状硫酸铵，边加边搅拌，冷冻离心收集硫酸铵饱和度为40～70％之间的沉淀；将所得沉淀转移至透析袋，用双蒸水透析，对透析截留液进行冷冻离心，上清液过sephadexG75柱，用双蒸水洗脱，收集280nm有吸收峰的洗脱液，冷冻干燥即得中药何首乌蛋白质。按上述方法制备的中药何首乌蛋白质能促进脾淋巴细胞增殖，可应用于制备增强免疫力的药物中。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 中药 何首乌 蛋白质 提取 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1、一种中药何首乌蛋白质的提取方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将何首乌的干燥块根粉末，加入正已烷浸没，脱脂2～3次，每次4～6小时；(2)离心，回收溶剂，风干残渣；(3)按1g何首乌的干燥块根粉末：60～70mL的比例加入50mmol pH为7.4的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液，4～6℃搅拌10～15小时，在4～6℃、12000～13000rpm条件下冷冻离心10～15min，得上清液A；(4)残渣再按1g何首乌的干燥块根粉末：40～50mL的比例加入上述缓冲液，4～6℃搅拌9～11小时，在4～6℃、12000～13000rpm条件下冷冻离心10～15min，得上清液B；(5)残渣再按1g何首乌的干燥块根粉末：30～40ml的比例加入上述缓冲液，4～6℃搅拌7～9小时，在4～6℃、12000～13000rpm条件下冷冻离心10～15min，得上清液C；(6)合并上清液A、B和C，即得缓冲提取液，向其中缓慢加入粉末状硫酸铵，边加边搅拌，冷冻离心收集硫酸铵饱和度为40～70％之间的沉淀，冷冻离心的条件为：4～6℃，11000～12000rpm，15～20min；(7)将所得沉淀转移至透析袋，4～6℃，用双蒸水透析36～48小时，每隔6～8小时换一次双蒸水；(8)在4～6℃、11000～12000rpm对透析截留液进行冷冻离心15～20min，上清液过sephadexG75柱，用双蒸水洗脱，收集280nm有吸收峰的洗脱液，冷冻干燥即得中药何首乌蛋白质。
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