[发明专利]诱导棉花胚发生性愈伤组织的方法

摘要

本发明公开了用于再生棉花植物的方法。在发育阶段中新型培养基组成、培养基添加剂和新的生长条件的使用导致胚发生、胚成熟和胚萌发的频率提高。该改进的方法导致转化的棉花植物的更高生产频率。

主权项

1.一种提高棉花植物再生效率的方法，包括以下步骤：(a)在非胚发生性愈伤组织诱导培养基上培养棉花植物组织以产生愈伤组织；(b)在胚发生性愈伤组织诱导和胚形成培养基上培养所述愈伤组织以产生胚；(c)在胚成熟培养基上培养所述胚以产生成熟的胚；(d)在胚萌发培养基上培养所述成熟胚；和(e)从所述成熟的胚获得再生的棉花植物；其中所述方法进一步包括选自以下步骤的至少一个附加步骤：在含油菜素类固醇的培养基中培养棉花组织；在具有改变的空气组成的气氛中培养棉花愈伤组织和/或胚；在发生愈伤组织诱导的步骤(a)中提高乙烯并在发生胚发生和胚成熟的步骤(b-d)中没有提高的乙烯的情况下培养棉花植物组织；在30℃至大约34℃的温度下培养愈伤组织和/或胚；在包含ABA的非胚发生性愈伤组织诱导培养基上培养棉花植物组织；和在包含硝酸钙和硫酸钾的非胚发生性愈伤组织诱导培养基上培养棉花植物组织；与MS培养基中的盐相比，硝酸铵、氯化钙、硝酸钾、碘化钾或氯化钴的量降低；与MS培养基中的盐相比，硫酸铜和硫酸锰的量提高，或没有硝酸钾。