[发明专利]用作抗体配体的表位定向扩增的方法

摘要

本发明包含一种采用由固相合成合成的表位肽混合物，选择和生产用于治疗，预防，诊断或研究目的的抗体的方法，该方法由一组规则限定，该规则关于取代已知表位基础或天然氨基酸的氨基酸的种类和出现频率。产生的抗体和与已知表位结合的抗体相关但不同。

主权项

一种生产抗体的方法，该方法包含采用含定向序列聚合物(DSPs)的组合物作为抗原，其中DSP组合物由包含以下步骤的方法制备：A.(1)选择第一基础肽序列，其中序列为目标表位的氨基酸序列；A.(2)采用固相肽合成合成该DSPs的第一盒，其中，对所述定向序列聚合物第一盒的每一个氨基酸位置，将一个氨基酸掺入到一个DSP中，该氨基酸随机选自氨基酸混合物，该氨基酸混合物包括：(i)在所述第一肽序列相应位置出现的氨基酸，该氨基酸以相对摩尔浓度a0出现在池中；(ii)在所述选择的氨基酸序列的所述位置出现的氨基酸的第一替代，所述第一替代根据氨基酸相似性限定，该第一替代氨基酸以相对摩尔浓度a1出现在混合物中；(iii)如果可以应用，在所述选择的氨基酸序列的所述位置出现的第二替代氨基酸，所述第二替代根据氨基酸相似性限定，该第二替代氨基酸以相对摩尔浓度a2出现在混合物中；(iv)如果可以应用，在所述选择的氨基酸序列的所述位置出现的第三替代氨基酸，所述第三替代根据第三氨基酸相似性限定，该第三替代氨基酸以相对摩尔浓度a3出现在混合物中；和(v)A：丙氨酸，以固定相对摩尔浓度A出现在混合物中，其中混合物中的氨基酸以开始合成前确定的相对固定摩尔比率加入，其中A的相对摩尔量超过该DSP总氨基酸浓度的50％，而且每一个a0和a1在0.05-50％范围内，每一个a2和a3在0-50％范围内，且其中a0+a1+a2+a3＝100-A；A.(3)通过以下步骤延伸该DSP的长度：(a)在同一条件下重复步骤(2)2到15个循环而延长DSP；(b)重复步骤(2)2到15个循环而延长DSP，每一个循环，采用混合物中氨基酸不同加入比率；(c)重复(1)和(2)2到15次，并利用基于多于一个基础肽的盒来延长DSP；(d)连接2到15个在步骤(2)单个循环中合成的盒；或(e)连接2到15个盒，第一个盒在步骤(2)的一个条件下合成，而第二个和更多的盒在步骤(2)的第二个条件下合成；A.(4)视情况进一步通过重复步骤(2)和(3)2到15个循环延长该DSP，其中每一个循环设计一个该DSP新盒，该新盒独立于步骤(2)之前循环派定的之前的任何盒；其中选择步骤(3)和步骤(4)所选的循环数使得该DSP的最终长度为约25到300个氨基酸残基；和B.(1)将该DSP与产生抗体的手段相接触；B.(2)选择和DSP结合的候选抗体；B.(3)鉴定该候选抗体，确定该候选抗体与第一基础肽和进一步与来源于第一基础肽序列的蛋白的结合亲和力；和B.(4)产生可用量的该候选抗体，从而生产抗体。