[发明专利]检测寡核苷酸的方法无效
申请号: | 200880112769.5 | 申请日: | 2008-08-21 |
公开(公告)号: | CN101835903A | 公开(公告)日: | 2010-09-15 |
发明(设计)人: | F·J-C·纳特;I·伯文克;A·吉尔 | 申请(专利权)人: | 诺瓦提斯公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;陈迎春 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | 本发明提供了用于对核酸寡核苷酸进行检测和/或定量的方法和组合物。这些方法和组合物可用于在生物样品中对诊断和/或治疗性用的合成靶寡核苷酸,例如适配体、RNAi、siRNA、反义寡核苷酸或核酶,加以检测和定量。 | ||
搜索关键词: | 检测 寡核苷酸 方法 | ||
【主权项】:
具有改进的灵敏度、在样品中鉴定或定量寡核苷酸分子的方法,所述方法包括:将反转录引物与寡核苷酸分子杂交,其中,所述反转录引物包含具有寡核苷酸识别序列的寡核苷酸分子结合部分,所述序列包含位于3’区域与所述寡核苷酸分子的区域互补的至少2个核苷酸以及位于5’区域的包含至少2个核苷酸的延伸尾;用第一延伸酶延伸杂交的反转录引物,产生反转录产物;将正向引物与所述反转录产物杂交,其中所述正向引物包含寡核苷酸分子结合部分,所述部分包含与所述寡核苷酸分子的区域相同的至少2个核苷酸;用第二延伸酶延伸杂交的正向引物,产生第一扩增子;将反向引物与所述第一扩增子杂交;用第二延伸酶延伸杂交的反向引物,产生与所述第一扩增子互补的第二扩增子;检测扩增产物;以及由此对所述寡核苷酸分子进行鉴定或定量。
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