[发明专利]应用同源重组定向克隆和亚克隆的方法和组合物有效
申请号: | 200910005085.1 | 申请日: | 2000-07-10 |
公开(公告)号: | CN101492694A | 公开(公告)日: | 2009-07-29 |
发明(设计)人: | F·A·斯图尔特;Y·张;J·P·P·穆伊雷尔斯 | 申请(专利权)人: | 欧洲分子生物学实验室 |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;C12N15/10;C12N1/21;C12N15/63;C12Q1/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 李 波;黄可峻 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | 本发明涉及应用同源重组定向克隆和亚克隆的方法和组合物。具体地,本发明涉及应用细菌重组酶介导的同源重组技术进行DNA亚克隆的方法和组合物。本发明涉及克隆的方法,含有用作克隆载体的多核苷酸的组合物,含有所述多核苷酸组合物的细胞,以及由细菌重组酶介导的克隆试剂盒,所述重组酶如RecE/T和Redα/β。 | ||
搜索关键词: | 应用 同源 重组 定向 克隆 方法 组合 | ||
【主权项】:
1.一种将双链靶DNA导入载体的方法,包括培养表达功能性重组酶的细菌,所述细菌细胞包括(a)靶DNA,含有第一个双链末端和第二个双链末端,以及(b)载体DNA,在载体DNA链上以下述顺序含有:(i)第一个双链同源臂(ii)复制起点,以及(iii)第二个双链同源臂,这样,载体DNA链的第一个同源臂序列与靶DNA链的第一个末端序列同源,载体DNA链的第二个同源臂序列与靶DNA链的第二个末端序列同源,这样,靶DNA可以在同源臂之间插入载体DNA中。
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