[发明专利]乳腺癌细胞C35基因siRNA表达载体的构建以及抗肿瘤治疗应用有效
| 申请号： | 200910013679.7 | 申请日： | 2009-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN101967495A | 公开（公告）日： | 2011-02-09 |
| 发明（设计）人： | 闫歌;尹昆;刘俏俏;朱嵩;谭效忠;赵桂华 | 申请（专利权）人： | 山东省寄生虫病防治研究院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/64;A61K48/00;A61P35/00;A61P15/14 |
| 代理公司： | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人： | 辛向东 |
| 地址： | 272000 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明属基因工程技术领域，具体地说是乳腺癌细胞C35基因siRNA序列的设计，表达载体的构建及其在抗肿瘤治疗中的应用。本发明根据siRNA的设计原则，分别选择C35蛋白编码区259nt-278nt，编码区282nt-300nt的核苷酸序列，设计相应的siRNA，用BLAST软件进行同源分析证实为C35高度保守序列后，化学合成单链寡核苷酸，体外经退火形成双链DNA，与真核表达载体pTZU6+1连接，酶切鉴定和序列测定分析表明成功构建了两种靶向C35基因序列的siRNA表达载体。上述表达载体通过阳离子脂质体介导转染乳腺癌细胞T47D后，采用RT-PCR和Western Blot实验以及MTT、TUNEL利Annexin V/PI流式细胞分析法实验均证实C35siRNA具有较强抑制乳腺癌细胞生长的作用，可以在制备抗肿瘤的药物中应用。 | ||
| 搜索关键词： | 乳腺 癌细胞 c35 基因 sirna 表达 载体 构建 以及 肿瘤 治疗 应用 | ||
【主权项】：
一种构建两种靶向C35基因序列的siRNA表达载体，其特征在于：在构建针对C35基因的siRNA表达载体时，根据siRNA的设计原则，分别选择C35蛋白编码区259nt‑278nt，编码区282nt‑300nt的核苷酸序列，设计相应的siRNA；用BLAST软件进行同源分析证实为C35高度保守序列后，化学合成单链寡核苷酸；体外经退火形成双链DNA，与真核表达载体pTZU6+1连接，酶切鉴定和序列测定分析表明成功构建了两种靶向C35基因序列的siRNA表达载体。
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