[发明专利]一种利用分子标记淘汰辣椒感疫病育种材料的方法无效
申请号: | 200910021240.9 | 申请日: | 2009-02-24 |
公开(公告)号: | CN101487049A | 公开(公告)日: | 2009-07-22 |
发明(设计)人: | 巩振辉;刘珂珂;逯明辉;李大伟;黄炜;陈儒钢 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 西安恒泰知识产权代理事务所 | 代理人: | 李郑建 |
地址: | 712100陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用分子标记淘汰辣椒感疫病育种材料的方法,将抗疫病性未知的辣椒育种材料播种于育苗盘进行常规管理,等幼苗长至3~4片真叶时,用改良SDS法分别提取不同育种材料嫩叶的基因组DNA,利用分子标记的正反向引物进行PCR扩增。PCR扩增产物在1.2%琼脂糖凝胶上进行电泳分离,溴化乙锭染色,利用凝胶成像系统观察、记录电泳结果。若电泳结果显示能扩增出一条长度为990bp的特征条带,则该材料为感疫病辣椒育种材料,将其淘汰;若电泳结果显示不能扩增出一条长度为990bp的特征条带,则该材料为抗疫病辣椒育种材料。该方法可将辣椒感疫病育种材料在其生长的早期阶段予以淘汰,具有淘汰周期短、成本低、结果可靠等优点,且不影响对其他性状的观察。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 分子 标记 淘汰 辣椒 疫病 育种 材料 方法 | ||
【主权项】:
1、一种利用分子标记淘汰辣椒感疫病育种材料的方法,其特征在于,具体过程包括如下步骤:(1)将抗疫病性未知的辣椒育种材料播种于育苗盘进行常规管理,待幼苗长至3~4片真叶时,用改良SDS法分别提取不同育种材料幼嫩叶片的基因组DNA;(2)以上述幼嫩叶片的基因组DNA为模板,利用分子标记的正反向引物进行PCR扩增反应;分子标记的正向引物的核苷酸序列为:5’-ctgtgatatggaaggggaacc-3’,反向引物的核苷酸序列为5’-aactcgctgggaaaagaatg-3’(3)PCR扩增产物在1.2%琼脂糖凝胶上进行电泳分离,溴化乙锭染色,利用凝胶成像系统观察、记录电泳结果;(4)对电泳结果进行如下判定:若电泳结果显示能扩增出一条长度为990bp的特征条带,说明该育种材料为感疫病辣椒育种材料,将其淘汰;若电泳结果显示不能扩增出一条长度为990bp的特征条带,说明该育种材料为抗疫病辣椒育种材料。
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