[发明专利]一种杜仲叶中提取绿原酸的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种杜仲叶中提取绿原酸的方法，本发明还公开了一种绿原酸在鱼病防治物中的应用，该方法包括粉碎、酶处理、超声波处理、过滤、提取、浓缩与纯化等步骤，本发明的方法具有工艺操作简便、成本低、无有害溶剂、得率高、适用于工业化生产等优点，而且绿原酸对水产养殖中常见的病原菌具有良好的抑菌效果，对嗜水气单胞菌的抑菌效果与抗生素类抗菌药物相当，能够增强机体免疫力，对细菌性疾病具有较强的预防作用。

主权项

1、一种杜仲叶中提取绿原酸的方法，其特征是该方法包括如下步骤：(1)、粉碎：将新鲜或干燥的杜仲叶粉碎，过80目筛，得到杜仲叶粉末；(2)、酶处理：在杜仲叶粉末中添加活力为500～1000U/g的植物纤维素酶并放入密闭容器中，植物纤维素酶的添加量为杜仲叶粉末重量的0.4％～0.6％倍，再在密闭容器中加入pH4～5的去离子水并搅拌均匀，去离子水的加入量为杜仲叶粉末重量的8～12倍，控制混合物的温度为35～50℃，恒温浸泡20小时以上；(3)、超声波处理：将酶处理后的混合物在常温、超声波频率为20～100KHz条件下波处理20～40min；(4)、过滤：将超声波处理后的混合物用高速离心机过滤或者用板框压滤机在0.1～0.4Mpa的压力范围内压滤出滤液；(5)、提取：过滤后的滤渣用滤渣重量8～12倍的、50～80℃的去离子水强制回流0.5～1小时，重复提取1～3次得到提取液；(6)、浓缩：合并过滤步骤和提取步骤中的提取液，在-0.085～-0.1Mpa的真空度条件下浓缩，浓缩液中加入浓缩液重量0.5％～2％倍的壳聚糖，搅拌，絮凝，使混合物在40～60℃条件下避光静置40～60min，然后过滤，滤液用滤液重量1％～3％倍的活性炭脱色，得到脱色后的浓缩液；(7)、纯化：脱色后的浓缩液上强极性大孔型大孔树脂柱进行饱和吸附，吸附后用体积百分含量为20％～30％的乙醇水洗脱，收集洗脱液浓缩、干燥后制得绿原酸粗品，将粗品用2～6倍去离子水重结晶得到绿原酸成品。