[发明专利]海雀稗体细胞60Co r射线辐射诱变方法

摘要

本发明涉及海雀稗体细胞⁶⁰Co r射线辐射诱变方法，属于植物培养方法技术领域。以海雀稗的颗粒状胚性愈伤组织为材料，⁶⁰Co r射线为辐射源，剂量率为1Gy/min，辐照剂量为60Gy。颗粒状愈伤组织在附加2，4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L、6-苄基氨基嘌呤0.05mg/L的愈伤组织继代培养基上增殖培养，用作辐射处理材料。辐射处理后的愈伤组织转到附加6-苄基氨基嘌呤2.0mg/L的愈伤组织分化培养基上，绿芽分化率在76％左右。绿芽转到附加萘乙酸0.5mg/L的生根培养基上，绿芽的成苗率为42％。本发明建立的海雀稗体细胞⁶⁰Co r射线辐射诱变方法适宜用于植物新品种开发，为在细胞水平上开展植物细胞辐射诱变育种提供条件。

主权项

1、海雀稗体细胞60Cor射线辐射诱变方法，其特征在于：1)材料选用海雀稗的颗粒状胚性愈伤组织为材料，60Cor射线为辐射源；2)培养基基本培养基由MS大量元素、MS微量元素与B5维生素组成，添加蔗糖30g/L；愈伤组织继代培养基：附加2，4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L，6-苄基氨基嘌呤0.05mg/L，琼脂条16g/L；愈伤组织分化培养基：添加6-苄基氨基嘌呤2.0mg/L，琼脂条8g/L；生根培养基：附加萘乙酸0.5mg/L，琼脂条8g/L；上述各种培养基在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值至5.8；3)方法选择颗粒状胚性愈伤组织在愈伤组织继代培养基上进行增殖培养，用作辐射处理材料，60Co r射线的剂量率为1Gy/min，辐照剂量设置分别为60Gy、70Gy或80Gy，其中60Gy或70Gy辐照10min，80Gy辐照20min。经过辐射诱变处理的愈伤组织转移到愈伤组织分化培养基上，在光照条件下培养，21d分化产生绿芽；绿芽先转移到愈伤组织分化培养基上培养25d，然后再转移到生根培养基上培养，21d形成具有根、茎、叶的完整再生植株；离体培养条件：培养室温度为26±2℃，光照强度为15001x，光照时间为16h/d。