[发明专利]一种同时检测牛奶中多种酞酸酯的液质联用测定方法

摘要

一种同时检测牛奶中多种酞酸酯的液质联用(LC-ESI-MS/MS)测定方法，属于食品检测技术领域。本发明牛奶样品用乙腈和氯化钠直接提取；液相色谱分离采用甲酸醋酸铵水溶液-甲醇体系作为流动相，梯度洗脱；质谱检测器检测，采用外标法以峰面积法进行定量检测。本发明方法灵敏度高、准确度和精密度好，专属性及确证性可靠，而且非常简便并可易于实际检测应用，且可非常好地满足实际检测中的需要。

主权项

1、一种经过样品处理、液相分离、质谱检测三个步骤，，(1)样品前处理及提取净化：称取蒙牛液态纯牛奶2g加到50mL的玻璃离心管中，加入200ng的9种酞酸酯等量混合标准溶液，即加标100ppb，然后涡旋混匀，再加入10mL的乙腈涡旋，接着再加0.8g NaCl进行涡旋并超声10min，然后以2000rpm低速离心10min，取上层乙腈清液到另一空的玻璃离心管中进行真空旋转蒸发至干，然后加入色谱纯的甲醇涡旋溶解旋干物并定容至1mL，转入至进样瓶进样；(2)液相分离：液相条件为：①色谱柱：Symmetry C18，5μm，100mm×2.1mm；②流动相A：999/1000体积比的5mmol醋酸铵重蒸水溶液+1/1000体积比的甲酸，流动相B：甲醇；③流速：0.25mL/min；④梯度洗脱程序：0-2min 20％B；2-3.5min 20％-95％B；3.5-11min95％B；11-12min 95％-20％B；12-13.5min 20％B；各洗脱时间段中均以流动相A补足余下的％数；⑤柱温：常温；⑥进样量：25μL；(3)质谱检测：质谱条件为：1)离子源：电喷雾离子化电离源ESI，正离子监测即ESI+；2)扫描方式：选择离子检测SRM；3)电离源温度：80℃，去溶剂温度：300℃；4)雾化气、鞘气为高纯氮气，碰撞气为高纯氦气；5)喷雾源气体流速20L/h；去溶剂气体流速：350L/h；6)喷雾电压、碰撞电压均自动优化至最佳灵敏度；选择离子条件：正离子SRM扫描分析时，各酞酸酯的离子选择通道m/z分别为：邻苯二甲酸二甲酯195/163、邻苯二甲酸二乙酯223/149、邻苯二甲酸二丁酯279/149、邻苯二甲酸二戊酯307/149、邻苯二甲酸二环己酯331/149、邻苯二甲酸二辛酯413/301、邻苯二甲酸二异葵酯447/149、邻苯二甲酸二异辛酯391/149、邻苯二甲酸丁基苄基酯313/149；(4)、浓度计算方法和检测限：按外标法以峰面积法计算牛奶中这9种酞酸酯的浓度。