[发明专利]淡水鱼粪便中香港海鸥形菌的检测方法无效
| 申请号： | 200910038362.9 | 申请日： | 2009-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN101519691A | 公开（公告）日： | 2009-09-02 |
| 发明（设计）人： | 胡静;陈清;吴敏;冯嘉丽;俞守义 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12R1/01 |
| 代理公司： | 广州市天河庐阳专利事务所 | 代理人： | 胡济元 |
| 地址： | 510515广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种淡水鱼粪便中香港海鸥形菌的检测方法，该方法首先经麦康凯培养基培养后挑出无色、半透明、扁平状和直径在0.5mm～1.0mm之间的微小菌落进行纯培养，然后通过尿素酶试验、氧化酶和触酶试验初步筛选出疑似香港海鸥形菌的细菌，再用PCR方法做进一步鉴定，最后通过革兰染色法进行确认；其中PCR方法所用的引物为5‘-ATCCCTAAGGCTAATACCCT-3′和5’-AATCTCTTCGAGGTTCGG TA-3’。 | ||
| 搜索关键词： | 淡水鱼 粪便 香港 海鸥 检测 方法 | ||
【主权项】：
1、淡水鱼粪便中香港海鸥形菌的检测方法，该方法由以下步骤组成：(1)取淡水鱼的粪便，接种在含有头孢哌酮的麦康凯培养基上，放入温度为37℃培养箱内培养48小时后取出；(2)挑取无色、半透明、扁平状和直径在0.5mm～1.0mm之间的微小菌落进行纯培养，得各菌落的纯培养物；(3)将步骤(2)所得纯培养物按以下步骤进行实验：首先进行常规尿素酶试验，选择该试验呈阳性的纯培养物进行常规氧化酶和触酶试验，然后取氧化酶和触酶试验均为阳性的纯培养物采用引物对5‘-ATCCCTAAGGCTAATACCCT-3′和5’-AATCTCTTCGAGGTTCGGTA-3’在退火温度为53℃的条件下进行PCR扩增30～35个循环，最后取PCR扩增片段为550bp的纯培养物进行常规的革兰染色检验，并在显微镜下观察，当观察结果为阴性的短杆菌或弧菌时，该纯培养物即为香港海鸥形菌。
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