[发明专利]一种铅绿褶菇子实体的生产方法

摘要

本发明涉及一种铅绿褶菇子实体的生产方法，其特征是将野生或人工栽培的铅绿褶菇(Chlorophyllum molybdites(Meyer.：Fr.)Massee)子实体接种至斜面综合PDA培养基分离培养，然后将扩大培养获得的斜面母种在液体培养基上培养，再将得到的液体菌种在麦粒培养基上培养得到生产用的麦粒菌种，最后将其播种到生产用培养基料里培养，待菌丝长到培养基料面的2/3时覆土，20～25℃温度下培养菌丝长至覆土层的2/3，再调节温度至25～30℃，直至长出子实体，待子实体完全开伞，菌褶呈铅绿色时采收，烘干得到产物。本发明铅绿褶菇子实体的生物效率可达20～50％，即每1kg生产用培养料可得到200～500g新鲜的铅绿褶菇子实体，可以满足科学研究的需要。

主权项

1. 一种铅绿褶菇子实体的生产方法，其特征包括以下的步骤：(1)将铅绿褶菇(Chlorophyllum molybdites(Meyer.：Fr.)Massee)子实体组织分离或多孢分离，然后接种至斜面综合PDA培养基，23～30℃下培养，至菌丝长满斜面，再以此作菌种按50～150g/L接种量扩大培养，得到能用于生产的铅绿褶菇母种；所述的综合PDA培养基的pH是6～7，其原料组成按质量份计，为已去皮去芽眼的马铃薯75～85份，葡萄糖6～10份，琼脂6～10份，磷酸二氢钾0.2～1.5份，硫酸镁0.2～1.5份和VB1 0.002～0.006份，并通过下述方法制得：原料按所述组成分别称重后，先将马铃薯切成小条放入锅中，加入原料组成总质量3.5～4.5倍的水，煮沸20～30分钟至马铃薯熟而不烂时，用6～8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补至原加水量后，加入琼脂熔化，再加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和VB1搅拌均匀，趁热装于试管灭菌后，冷却到45～50℃倒成斜面作接种用；(2)将步骤(1)得到的铅绿褶菇母种按50～150g/L的接种量接种至液体培养基里，于温度为22～30℃、摇速为110～150转/分钟、培养时间为7～12天，得到的菌液褐色，菌球黄豆大小，即为液体菌种，所述的液体培养基的pH为6～8，其原料组成按质量份计，为已去皮去芽眼的马铃薯88～91份，葡萄糖8.2～9.0份，KH2PO4 1.2～1.5份，MgSO4 0.6～0.75份和VB1 0.004～0.006份，并通过下述方法制得：原料按所述组成分别称重后，先将马铃薯切成小条放入锅中，加入原料组成总质量4.3～4.5倍的水，煮沸20～30分钟左右至马铃薯熟而不烂时，用6～8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补水至原加水量后，加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和VB1，搅拌均匀，趁热灭菌，冷却后作接种用；(3)将步骤(2)得到的液体菌种按50～180mL/kg的接种量接种至麦粒培养基里，20～30℃培养30～45天，菌丝长满培养基，正常菌丝呈白色，即得到生产用的麦粒菌种，所述的麦粒培养基为pH11～12，按其原料组成总质量分数100％计，为小麦30％～50％，棉子壳30％～50％，麸皮10％～20％，碳酸钙0.5％～1.2％，石膏0.5％～1.2％，磷酸二氢钾0.3％～1％和石灰0.5～1.2％，并由下述方法得到：原料按所述组成分别称重后，先把小麦浸泡20～30小时，再用自来水冲洗干净，用锅煮熟20～38分钟，过滤滴干拌入其它组份混合拌均，此时含水量为50％～60％，装入培养瓶里灭菌，冷却后作接种用；(4)将步骤(3)得到的生产用的麦粒菌种按培养基质量5％～18％的播种量播种到经过堆料发酵得到的生产用培养基里，于温度20～30℃，空气相对湿度50％～70％，暗培养至菌丝白色粗壮长满到培养料的2/3时，则进行覆土，覆土层的厚度1～1.5cm，于温度20～25℃、光照200～500Lx下培养至菌丝长至覆土层的2/3，再调节培养温度至25～30℃，湿度70％～90％，从播种起计算培养时间为50～100天可长出原基，所述的生产用培养基其原料按总质量分数100％计，由培养基料30％～50％和水50％～70％组成，所述的培养基料按总质量分数100％计，由稻草88％～90％，花生麸3％～5％，尿素0.5％～1％，硫酸铵0.5％～1％，磷肥1％～2％，石膏0.5％～1％，石灰1％～2％和多菌灵0.5％～1％组成；(5)步骤(4)长出原基继续培养1～3天，子实体长高至完全开伞，菌褶呈铅绿色时采收，烘干得到产物。