[发明专利]接瓣兰种苗的试管繁殖方法

摘要

一种接瓣兰种苗的试管繁殖方法，本方法用接瓣兰母株的果实做为外植体，包括无菌播种或/和原球茎的增殖并分化培养，壮苗培养和试管苗移栽等步骤，采用专门配制的复合花宝培养基1、复合花宝培养基2、复合花宝培养基3分别进行种子萌发培养，原球茎的增殖并分化培养和壮苗培养，最后移栽试管苗，并提出了合适的培养条件。本发明具有种子萌发率高、成苗快、种苗品质好、成本低廉等特点，能在短期内获得大量的试管苗，成苗的移栽成活率90％以上，能为接瓣兰的种苗生产提供一条有效的途径。

主权项

1、接瓣兰种苗的试管繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：(1)材料：选取生长健壮的接瓣兰母株，于开花时进行人工授粉，将授粉后发育至基本成熟而未开裂时的果实做为外植体用于播种；(2)无菌播种或/和原球茎的增殖并分化培养：a、无菌播种：将所述外植体用70％-80％的酒精浸泡30-60秒后置于0.1％-0.2％的升汞溶液中消毒10-20分钟，再用无菌水漂洗4～5次后切开果实，将其粉末状胚接种到种子萌发培养基中培养，所述的种子萌发培养基为复合花宝培养基1，其组份为每升含有：花宝1号2克，花宝2号1克，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，盐酸硫胺素0.05-0.2毫克，盐酸吡哆醇0.4-0.8毫克，烟酸0.4-0.8毫克，萘乙酸0.2-1毫克，椰子汁100-200毫升，蔗糖15-30克，琼脂6-7克，活性碳0.5-2克，pH 5.4-5.6；b、原球茎的增殖并分化培养：将原球茎培养在复合花宝培养基2上，获得大量的类原球茎，再将类原球茎在复合花宝培养基1上培养成小苗，所述的复合花宝培养基2每升含有花宝1号1克，花宝2号2克，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，盐酸硫胺素0.05-0.2毫克，盐酸吡哆醇0.4-0.8毫克，烟酸0.4-0.8毫克，6-苄基嘌呤0.5-2.0毫克，萘乙酸0.2-1毫克，椰子汁100-200毫升，蔗糖15-30克，琼脂6-7克，活性碳0.5-2克，pH 5.4-5.6；(3)壮苗培养：将在上述无菌播种培养所得的小植株或通过原球茎增殖并分化而得的小苗接种培养在壮苗培养基上，所述的壮苗培养基为复合花宝培养基3，其组份为每升含有：花宝1号2-3克，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，盐酸硫胺素0.05-0.2毫克，盐酸吡哆醇0.4-0.8毫克，烟酸0.4-0.8毫克，香蕉匀浆50-100克，萘乙酸0.2-1毫克，蔗糖15-30克，琼脂6-7克，活性碳0.5-2克，pH 5.4-5.6；(4)试管苗移栽：当植株约4-6厘米高时，将培养瓶转移到自然光下炼苗10-15天，然后将植株从培养瓶中取出，洗净根部的培养基，移入兰石∶蕨根∶泥炭土为1∶0.5～2∶0.5～2的混合基质中；上述步骤(2)～(3)中培养条件为培养温度24-28℃，光照度1500～2000lx，光照12-16小时/天。