[发明专利]一种生长速度快且耐铀和耐氟能力强的氧化亚铁硫杆菌基因工程菌株制备方法和应用无效
申请号: | 200910044069.3 | 申请日: | 2009-08-10 |
公开(公告)号: | CN101659961A | 公开(公告)日: | 2010-03-03 |
发明(设计)人: | 丁德馨;李广悦;王永东;刘劼;胡南;刘玉龙;王有团 | 申请(专利权)人: | 南华大学 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C22B3/18;C22B60/02;C12R1/01 |
代理公司: | 湖南省国防科学技术工业办公室专利中心 | 代理人: | 冯 青 |
地址: | 421001湖南省衡阳市常*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种生长速度快且耐铀和耐氟能力强的氧化亚铁硫杆菌基因工程菌株制备方法和应用,该菌株为Acidithiobacillus ferrooxidans QEY-6(pJRD215-PT-rcf),CCTCCM 209155。首先是pQE30的T5启动子和T0终止子的扩增,并与pJRD215一起构建穿梭表达载体pJRD215-PT;其次是藤黄微球菌rpf基因、新月柄杆菌cc3302基因和秀丽隐杆线虫flr-4基因的扩增并克隆至T载体;第三是重组穿梭表达载体pJRD215-PT-rcf的构建;第四是融合表达rpf、cc3302和flr-4基因的氧化亚铁硫杆菌基因工程菌株的构建。本发明操作简单,重复性好,可以提高对含氟铀矿石的耐受性,缩短浸铀周期,提高浸出率,降低耗酸率。 | ||
搜索关键词: | 一种 生长 速度 能力强 氧化 亚铁 杆菌 基因工程 菌株 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1、一种生长速度快且耐铀和耐氟能力强的氧化亚铁硫杆菌基因工程菌株制备方法,其特征在于:用pJRD215-PT载体在氧化亚铁硫杆菌QEY-6中融合表达rpf、cc3302和flr-4基因,包括:(1)氧化亚铁硫杆菌QEY-6和大肠杆菌S17-1(pJRD215-PT-rcf)的培养;(2)接合转移;(3)阳性克隆筛选。
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