[发明专利]一种编码产碱杆菌腈水解酶的基因及其用于制备扁桃酸单一对映体的方法

摘要

本发明涉及编码具有腈水解酶活性的多肽的碱基序列，涉及包含该碱基序列的载体，并涉及含有该碱基序列或载体的转化体，其中所述的载体包含该碱基序列或碱基序列与相应的信号序列相连接的组合体。本发明还涉及由该碱基序列编码的氨基酸序列。本发明另外还涉及利用该重组表达的腈水解酶作为催化剂，由相应的扁桃腈制备扁桃酸单一对映体及其类似物的技术方法。

主权项

一种催化扁桃腈水解合成(R)-(-)-扁桃酸的腈水解酶，其特征在于，所述的腈水解酶是由产碱杆菌属Alcaligenes sp.ECU0401，保藏号为CGMCC No.2009的菌株得到的具有如下(a)或(b)的DNA的碱基序列：(a)ATGCAGACAA GAAAAATCGT CCGGGCAGCC GCCGTACAGG CCGCCTCTCCCAACTACGAC CTGGCAGCAG GTGTTGAIAA AACCATTGAA CTGGCTCGACAAGCGCGTGA TGAAGGCTGC GACCTGATCG TATTTGGTGA AACCTGGTTGCCAGGCTATC CCTTCCACGT CTGGCTAGGT GCGCCGGCCT GGTCACTGAAATACAGTGCT CGTTACTATG CCAACTCACT CTCGCTGGAC AGTGCAGAGTTTCAGCGCAT TGCCCAGGCT GCGCGAACCT TGGGCATTTT CATCGCATTGGGCTATAGCG AACGCAGCGG TGGCAGCCTG TATCTGGGCC AATGCCTGATCGACGACAAA GGCGAGATGC TGTGGTCACG TCGCAAACTC AAACCCACGCATGTAGAGCG CACCGTATTT GGTGAGGGTT ATGCCCGTGA TCTGATTGTGTCCGACACAG AACTGGGACG CGTCGGCGCT CTATGCTGCT GGGAGCATTTGTCGCCCTTG AGCAAGTACG CGCTGTACTC CCAGCATGAA GCCATTCACATTGCTGCCTG GCCGTCGTTT TCGCTATACA GCGAACAGGC CCACGCCCTCAGCGCCAAGG TGAACATGGC CGCCTCGCAA ATCTATTCGG TGGAAGGCCAATGCTTTACC ATCGCCGCCA GCAGTGTGGT CACCCAAGAG ACGCTAGACATGCTGGAAGT GGGTGAGCAC AACGCCTCTT TGCTGAAAGT GGGCGGTGGCAGTTCCATGA TTTTTGCACC GGACGGACGT ACACTGGCTC CCTACCTGCCTCACGATGCC GAGGGCTTGA TCATTGCCGA TCTGGATATG GAGGAGATTGCCTTCGCCAA GGCGATCAAT GACCCCGTGG GCCACTATTC CAAACCTGAAGCCACCCGTC TGGTGCTGGA CTTGGGGCAC CGAGAACCCA TGACTCGGGTGCACTCCAAA AGCGTGACCA AGGCAGAGGC TTCCGAGCCA GGTGTGCAAAGTACGGCTAC CTCAGTCGCT ATCAGCCATC CACAGGACTC GGACACACTGCTCGTGCAAG AACCGTCCTG A；或者(b)在保持由上述(a)碱基序列编码的腈水解酶的催化活性的前提下，由插入、缺失或替换上述(a)碱基序列中至少一个碱基而得到的变异的碱基序列。