[发明专利]罗斯福火星花的组织培养方法

摘要

本发明涉及罗斯福火星花的组织培养方法，包括无菌材料的获得，芽的分化和增殖，小球茎壮苗培养，生根培养，炼苗与移栽等步骤。与现有技术相比，本发明大大提高了罗斯福火星花的繁殖速度和苗的整齐度，可实现育苗的工厂化大批量生产。

主权项

罗斯福火星花的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)无菌材料的获得在春季挖取罗斯福火星花大球茎旁的小球茎，除去外面包裹的茎片，用自来水冲洗1-3h，再于超净工作台上，依次利用质量浓度为70-75％的乙醇浸泡10-50s，体积浓度为0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用无菌水冲洗4-6次，利用无菌滤纸吸干小球茎表面的水分后，将小球茎切成0.5-2cm的带腋芽的节段，节段接种于小球茎诱导培养基上；(2)芽的分化和增殖节段接种于小球茎诱导培养基上1-3周后，其基部开始膨大，出现黄绿色突起，3-4周后节段上可以看见芽分生组织，再培养1-2个月，有0.1-0.3cm大小的小球茎长出，将小球茎切下移入球茎增殖培养基中进行增殖培养，球茎基部的愈伤组织较多，但小球茎仍增殖较快，生长发育良好；(3)小球茎壮苗培养在小球茎诱导培养基里诱导出的小球茎呈丛状分布，每丛有4-6个球，将小球茎再分成小丛，每丛有1-3个芽，然后将分成小丛的小球茎转至壮苗培养基上，小球茎迅速膨大，20-30天后可以长到0.3-0.5cm；(4)生根培养取0.3-0.5cm的小球茎，转接入生根培养基中诱导生根，8-15天后小球茎幼苗的基部分化出白色的根原基，25-35天后可以长至2-4cm，根系粗壮，须根众多，生根率为90-100％；(5)炼苗与移栽在生根培养30-35天，根系长至2-3cm时，选择根系发达、生长健壮的无菌幼苗，于室内开瓶炼苗1-3天，然后将苗取出，洗净其根部的琼脂，栽于温室的苗床中驯化25-40天，即可移栽室外，并给予肥水管理。