[发明专利]用于快速高效分离纯化巯基蛋白酶的纳米复合亲和膜的制备

摘要

本发明涉及用于快速高效分离纯化巯基蛋白酶的纳米复合亲和膜的制备，包括：(1)将六氟异丙醇HFIP和甲酸混合液作为溶剂体系，混掺入反应容器内；(2)将尼龙6和壳聚糖粉末反应容器内；(3)置于水浴振荡器内，得尼龙6/壳聚糖纺丝液；(4)用纺丝液，进行电纺，得纳米纤维膜，干燥；(5)切成圆形膜片，活化；(6)洗数次后，放入到染料溶液中反应；(7)加入NaCl溶液处理；(8)加入Na₂CO₃进行固色反应；(9)冷却，洗涤。本发明的制备方法操作简单，耗时较少，吸附量大；制备出的纳米亲和膜快速、简便、廉价、高效，可高效纯化巯基蛋白酶，适用于规模化生产。

主权项

1.用于快速高效分离纯化巯基蛋白酶的纳米复合亲和膜的制备，包括：(1)将体积比为9～12∶1的六氟异丙醇HFIP和甲酸混合液作为溶剂体系，混掺入反应容器内，温度为40～60℃，水浴振荡反应20～45min；(2)将尼龙6和壳聚糖粉末在搅拌条件下缓慢加入上述反应容器内，继续搅拌2～3h至完全溶胀，其中尼龙6颗粒质量浓度为5～8wt％，壳聚糖的质量浓度为0～2wt％；(3)将上述反应容器置于水浴振荡器内，在回流冷凝下，缓慢加热至40～60℃，振荡15h～30h至完全溶解，得尼龙6/壳聚糖纺丝液；(4)用注射器抽取尼龙6/壳聚糖纺丝液，固定在静电纺丝装置上，调节纺丝参数进行电纺，静电压为10～18kv；接收屏采用铝箔接地接收，针头与接收屏的距离为10～20cm，得尼龙6/壳聚糖超细纳米纤维膜，然后干燥；(5)将干燥后的尼龙6/壳聚糖纳米纤维膜切成圆形膜片，放入50～60℃，浓度为10～15wt％的NaOH溶液中活化20-30min；(6)将上述纤维膜，用热水洗数次后，放入到染料溶液中反应；(7)用20～30wt％的NaCl溶液在40℃～80℃水浴振荡处理20～45min，使染料吸附到尼龙6/壳聚糖纳米纤维膜上；(8)调节水浴温度，用25～30wt％Na2CO3在60℃～90℃水浴振荡反应3～6h；(9)冷却，洗涤，或保存于Tris-HCl缓冲液，得到以染料为配基的尼龙6/壳聚糖纳米纤维亲和膜。