[发明专利]一种检测胰腺癌血清标志物的方法

摘要

本发明涉及医学分子生物学技术领域，是一种检测胰腺癌血清标志物的方法。胰腺癌恶性程度高，早期诊断困难，缺乏确实有效的方法，预后极差。手术切除是唯一可以延长生存期的治疗手段。不幸的是，绝大多数胰腺癌患者诊断时已属晚期(TNM分期III、IV期)，失去了手术机会。本发明目的是提供一种检测胰腺癌血清标志物的方法，并将该方法用于胰腺癌的早期诊断和开腹手术指征的临床判断中。本发明经研究发现血清中miR-196a的表达水平与胰腺癌的术后生存期密切相关，之后发现miR-196a的相对表达丰度可以很好的将可切除胰腺癌(TNM分期I、II期)及进展期胰腺癌(TNM分期III、IV期)很好地鉴别开来，因此利用本发明的方法可以定量检测胰腺癌血清标志物microRNA-196a，而且检测方便、敏感性好、准确率高。

主权项

1、一种检测胰腺癌血清标志物的方法，其特征在于该胰腺癌血清标志物是microRNA-196a，该方法包括以下步骤：A)待检血液样本，离心，取血清；B)在经去酶剂处理的血清中加入Cel-miR-39作为标化物，抽提总RNA；C)用Taqman microRNA反转录试剂盒对抽提的RNA进行反转录反应；D)测定血清中microRNA-196a的标准化相对表达丰度(60-Ct)：用荧光实时定量PCR(RT-PCR)技术，测得所得血清中microRNA-196a的表达丰度(Ct值)，用Ct196a表示；并用同样的方法测得加入的标化物Cel-miR-39的Ct值，用Ct39表示；计算各血清样本中microRNA-196a的初步定量值(60-Ct196a)，然后比较得出各样本中最小的Ct39值(Ct39min)，计算出血清中microRNA-196a的标准化相对表达丰度(60-Ct)，(60-Ct)＝(60-Ct196a)-(Ct39-Ct39min)。